試劑標(biāo)準(zhǔn)品或校準(zhǔn)品定值的溯源問(wèn)題

歐盟關(guān)于體外診斷用品導(dǎo)則 《Directive 98/79/EC》中對(duì)體外診斷用品的溯源性進(jìn)行了要求："校準(zhǔn)物質(zhì)和質(zhì)控物質(zhì)定值的溯源性必須通過(guò)已有的高一級(jí)的參考方法和參考物質(zhì)予以保證"。

該導(dǎo)則的實(shí)施意味著體外診斷用品的量值溯源問(wèn)題已上升到了法律高度。為此，國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)化組織（ISO）1999年起草了5個(gè)相關(guān)的ISO標(biāo)準(zhǔn)文件ISO/CD 17511"校準(zhǔn)物質(zhì)和質(zhì)控物質(zhì)定值的計(jì)量學(xué)溯源性"和ISO/CD 18153"酶催化濃度校準(zhǔn)物質(zhì)和質(zhì)控物質(zhì)定值的計(jì)量學(xué)溯源性"。 量值的溯源性

測(cè)量結(jié)果或標(biāo)準(zhǔn)量值的屬性，它使測(cè)量結(jié)果或標(biāo)準(zhǔn)量值通過(guò)連續(xù)的比較鏈與給定的標(biāo)準(zhǔn)聯(lián)系起來(lái)，給定的標(biāo)準(zhǔn)通常是國(guó)家或國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)，比較鏈中的每一步比較都有給定的不確定度。

溯源性解決的是測(cè)定結(jié)果的正確性問(wèn)題，即測(cè)定均值與真值的一致程度。理論上溯源性不解決正確性以外的測(cè)定質(zhì)量問(wèn)題。

臨床檢驗(yàn)量值的溯源性要求目前主要體現(xiàn)在兩個(gè)環(huán)節(jié)：一是產(chǎn)品的校準(zhǔn)物定值，二是臨床檢驗(yàn)結(jié)果，對(duì)象分別是產(chǎn)品的生產(chǎn)企業(yè)和臨床實(shí)驗(yàn)室。絕大多數(shù)臨床實(shí)驗(yàn)室使用商品化的試劑盒，因此企業(yè)生產(chǎn)的校準(zhǔn)物的溯源性顯得更為重要。歐盟有關(guān)體外診斷用品導(dǎo)則提出的溯源性要求和ISO17511及ISO18153都是針對(duì)生產(chǎn)企業(yè)而言，標(biāo)準(zhǔn)品或校準(zhǔn)品的定值，必須通過(guò)現(xiàn)有的較高級(jí)別的參考測(cè)量程序和參考物質(zhì)以保證其溯源性。

量值溯源鏈的結(jié)構(gòu)及工作原理

臨床檢驗(yàn)的量值溯源可以有不同模式，其核心內(nèi)容是使各測(cè)量方法的測(cè)量值與公認(rèn)的標(biāo)準(zhǔn)有著密切的聯(lián)系。一個(gè)樣品或校準(zhǔn)物質(zhì)的測(cè)量結(jié)果的溯源性通過(guò)一系列對(duì)比測(cè)量而建立，對(duì)比測(cè)量中的測(cè)量過(guò)程和校準(zhǔn)特質(zhì)的計(jì)量學(xué)等級(jí)由低到高組成一條連續(xù)的鏈（溯源鏈）。鏈的頂端是國(guó)際單位制（SI）單位（基本或?qū)С鰡挝唬?，一?jí)參考測(cè)量過(guò)程是具有最高計(jì)量學(xué)特性的參考測(cè)量過(guò)程，必須是基于特異、無(wú)需同量校準(zhǔn)而能溯源至SI單位、低不確定度的測(cè)量原理，目前大家普遍認(rèn)為可用于一級(jí)參考測(cè)量過(guò)程的測(cè)量原理僅限于同位素稀釋/質(zhì)譜（ID/MS）、庫(kù)侖法、重量法、滴定法和依數(shù)性（凝固點(diǎn)降低）測(cè)量等。一級(jí)參考物質(zhì)是測(cè)量單位的體現(xiàn)，具有最可能小的測(cè)量不確定度，它可由一級(jí)參考測(cè)量過(guò)程直接定值，也可通過(guò)可靠的雜質(zhì)分析間接定值，一級(jí)參考物質(zhì)一般是高度純化的被測(cè)物質(zhì)。二級(jí)參考測(cè)量過(guò)程是經(jīng)充分論證，其不確定度能滿(mǎn)足特定要求，能用于低一級(jí)測(cè)量過(guò)程評(píng)價(jià)和參考物質(zhì)鑒定的測(cè)量過(guò)程，二級(jí)參考測(cè)量過(guò)程用一級(jí)參考物質(zhì)校準(zhǔn)。一級(jí)和二級(jí)參考物質(zhì)一般是經(jīng)計(jì)量權(quán)威機(jī)構(gòu)或行政機(jī)構(gòu)認(rèn)證的認(rèn)證參考物質(zhì)（CRM）。

目前臨床檢驗(yàn)參考系統(tǒng)現(xiàn)狀

臨床檢驗(yàn)樣品是生物樣品，有高度的復(fù)雜性。目前臨床檢驗(yàn)項(xiàng)目大約有400-600個(gè)，能溯源至SI單位的只有25-30個(gè)，它們主要是一些化學(xué)定義明確的小分子化合物，包括電解質(zhì)類(lèi)物質(zhì)（如鉀、鈉、氯、鎂、鈣、鋰離子等）、代謝物類(lèi)物質(zhì)（如膽固醇、甘油三酯、葡萄糖、肌肝、尿酸、尿素等）和某些甾體類(lèi)激素及甲狀腺激素。這些項(xiàng)目雖占的數(shù)目不大，卻是臨床檢驗(yàn)常規(guī)項(xiàng)目的主要組成部分。

除少數(shù)項(xiàng)目外，其余多數(shù)臨床檢驗(yàn)項(xiàng)目因被測(cè)物質(zhì)（主要是生物大分子類(lèi)物質(zhì)）的復(fù)雜性（如混合物、異構(gòu)體等），其一級(jí)參考測(cè)量過(guò)程的建立和一級(jí)參考物質(zhì)的制備非常困難，其量值溯源只能停留在較低水平。這類(lèi)檢驗(yàn)項(xiàng)目目前國(guó)際上有以下幾種情況，一種是有國(guó)際參考測(cè)量過(guò)程（非一級(jí)參考測(cè)量過(guò)程），也有用此參考測(cè)量過(guò)程定值的國(guó)際參考物質(zhì)，如糖化血紅蛋白：另一種是國(guó)際參考測(cè)量過(guò)程，無(wú)國(guó)際參考物質(zhì)，大約有30個(gè)檢驗(yàn)項(xiàng)目屬于這種情況：第三種情況是有國(guó)際參考物質(zhì)及定值方案，但無(wú)國(guó)際參考測(cè)量過(guò)程，屬于這種情況的檢驗(yàn)項(xiàng)目約有250；還有約300個(gè)既無(wú)國(guó)際參考測(cè)量過(guò)程，也無(wú)國(guó)際參考物質(zhì)。

能溯源至SI單位的檢驗(yàn)項(xiàng)目的高級(jí)參考系統(tǒng)（一級(jí)和二級(jí)參考測(cè)量過(guò)程、一級(jí)參考物質(zhì)和高準(zhǔn)確度基質(zhì)參考物質(zhì)）多數(shù)由美國(guó)NIST、德國(guó)臨床化學(xué)會(huì)（DCKC）和歐共體標(biāo)準(zhǔn)局（BCR ）建立和保持。也有一些大學(xué)、醫(yī)院、研究機(jī)構(gòu)和生產(chǎn)廠家的專(zhuān)業(yè)實(shí)驗(yàn)室建立了自己的參考測(cè)量過(guò)程，多年從事參考測(cè)量工作，達(dá)到了很高的計(jì)量學(xué)水平。不能溯源至SI單位的檢驗(yàn)項(xiàng)目的參考系統(tǒng)（主要是參考物質(zhì)）主要來(lái)自有關(guān)國(guó)際組織，如世界衛(wèi)生組織（WHO）、國(guó)際臨床化學(xué)會(huì)（IFCC）等。這些測(cè)量過(guò)程和物質(zhì)將很可能成為國(guó)際一級(jí)參考測(cè)量過(guò)程和一級(jí)參考物質(zhì)。

乙型肝炎病毒表面抗原定量測(cè)定試劑盒和乙型肝炎病毒表面抗體定量測(cè)定試劑盒中的標(biāo)準(zhǔn)品即為由世界衛(wèi)生組織（WHO）建立標(biāo)準(zhǔn)品，中國(guó)藥品生物制品檢定研究院建立二級(jí)標(biāo)準(zhǔn)品并溯源至WHO、生產(chǎn)企業(yè)再建立自己的標(biāo)準(zhǔn)品，并且必須溯源至中國(guó)藥品生物制品檢定研究院。

量值溯源已受到普遍的重視，檢驗(yàn)結(jié)果的溯源性將可能成為體外診斷試劑生產(chǎn)和臨床實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)中的重要質(zhì)量指標(biāo)。體外診斷試劑的研發(fā)者應(yīng)高度重視臨床檢驗(yàn)的溯源性問(wèn)題，在研發(fā)定量測(cè)定試劑盒之初，充分調(diào)研與測(cè)定項(xiàng)目有關(guān)的標(biāo)準(zhǔn)品的溯源性問(wèn)題，并認(rèn)真學(xué)習(xí)有關(guān)文獻(xiàn)如ISO/CD 17511及ISO 18153等，以真正提高所研發(fā)產(chǎn)品的質(zhì)量水平。