在新冠大流行之前,可能很多人對病毒和病毒檢測還比較陌生,但是現(xiàn)在對于病毒檢測可以說是無人不知、無人不曉了。但是對于核酸采樣管中的病毒樣本保存液,可能就不是每個(gè)人都知曉了,本文主要介紹保存液的pH值范圍。
病毒保存液或者說樣本保存液,其pH值是一個(gè)重要的基礎(chǔ)參數(shù),它為病毒的核酸樣本提供了一個(gè)適宜的pH值。核酸一般在中性至弱堿性的環(huán)境溶解較好,病毒保存液的pH值通常是6.5-8.5的范圍之類。新冠病毒的核酸是RNA,與DNA相比在中性至弱堿性時(shí)更容易游離到水相,所以Tris平衡酚(pH=8.0)分離提純核酸時(shí),RNA處于水相,DNA處于有機(jī)相。
市場上采樣管病毒保存液的pH范圍可能各家不一樣,但差異不大。pH=7與pH=8的時(shí)候,氫離子(或氫氧根)濃度均較低,相差很小,但是pH是1和2或者13和14,差距就比較大了。同時(shí)當(dāng)pH為8時(shí),氫氧根濃度小,0.9倍的酸會使pH降到7,但需要9倍的堿才會使pH升到9。因此保存液在存儲時(shí)需注意密封,可能會過多吸收空氣中酸性的CO2,導(dǎo)致pH降低。
當(dāng)pH值為7時(shí),表示體系中氫離子或氫氧根離子濃度是一千萬分之一(pH值或者pOH值為對應(yīng)離子濃度的以10為底的負(fù)對數(shù),兩者之和在25度時(shí)為14)。當(dāng)pH為8時(shí),pOH為6,OH-濃度為千萬分之10。另外25度時(shí),中性水的pH為7,溫度升高到100度時(shí)則為6。保存液采用的超純水,其pH略低于7,會加入弱堿性緩沖鹽將pH值調(diào)至7.5以上,以滿足核酸的保存。
另外,病毒保存液在罐裝入采樣管時(shí),車間環(huán)境和滅菌條件也會影響pH值,長菌會降低pH,無菌等級越高,越不會導(dǎo)致pH值的改變。
在保存液的生產(chǎn)中,為了保持體系的pH值穩(wěn)定,會加入緩沖鹽的成分,對pH的改變有緩沖作用,有小的變動正常操作不會產(chǎn)生影響。