單核細(xì)胞增生李斯特氏菌的培養(yǎng)特性與生化反應(yīng)！

單核細(xì)胞增生李斯特氏菌（Listeria monocytogenes）簡稱單增李斯特菌，革蘭氏陽性小桿菌，大小為（0.4-0.5）μm×（0.5-2）μm，直或稍彎，多數(shù)菌體一端較大，似棒狀，常呈V字型排列，有的呈絲狀，偶爾可見雙球狀。在22℃-25℃環(huán)境可形成4根鞭毛。本菌對理化因素抵抗力較強(qiáng)。在士壤、糞便、青貯飼料和干草內(nèi)能長期存活:對堿和鹽抵抗力強(qiáng)，對青霉素、氨芐青霉素、四環(huán)素、磺胺等均敏感。本菌營養(yǎng)要求不高，兼性厭氧。菌落初期極小，水滴樣，經(jīng)37℃數(shù)天培養(yǎng)后，直徑可達(dá)2mm，初期菌落光滑、透明，后變灰暗。血平板上的菌落有β-型溶血環(huán)本菌耐堿不耐酸，在4℃-45℃均能生長，最適生長溫度30℃-37℃。 一、菌株來源

李斯特氏菌是1926年英國南非裔科學(xué)家穆里在病死的兔子體內(nèi)首次發(fā)現(xiàn)的。為紀(jì)念近代消毒手術(shù)之父、英國生理學(xué)家約瑟夫·李斯特（1827-1912），1940年，在第三屆國際微生物學(xué)大會上將其命名為李斯特氏菌。

二、菌株種類

國際上公認(rèn)的李斯特菌共有以下七個(gè)菌株：單核細(xì)胞增生李斯特氏菌（Listeria monocytogenes）、綿羊李斯特菌（Listeria iuanuii）、英諾克李斯特菌（Listeria innocua）、威爾斯李斯特菌（Listeria welshimeri）、西爾李斯特菌（Listeria seeligeri）、格雷李斯特菌（Listeria grayi）、默里李斯特菌（Listeria murrayi）。其中，單核細(xì)胞增生李斯特氏菌是唯一能夠引起人類疾病的，它是一種人畜共患病的病原菌，中毒嚴(yán)重的可引起血液和腦組織感染。單核細(xì)胞增生李斯特氏菌簡稱單增李斯特氏菌，為革蘭陽性菌，屬厚壁菌門。

三、細(xì)菌分型

根據(jù)菌體（O）抗原和鞭毛（H）抗原，將單增李斯特氏菌分成13個(gè)血清型，分別是1/2a、1/2b、1/2c、3a、3b、3c、4a、4b、4ab、4c、4d、4e 和“7”13 個(gè)血清型。致病菌株的血清型一般為1/2b、1/2c、3a、3b、3c、4a、1/2a和4b，后兩型尤多。該菌與多種革蘭陽性菌有共同抗原，故血清學(xué)診斷無意義。

本菌的抗原結(jié)構(gòu)與毒力無關(guān)，且本菌與葡萄球菌、鏈球菌、肺炎球菌等多數(shù)革蘭氏陽性菌和大腸桿菌有共同抗原，故血清學(xué)診斷無意義。

四、形態(tài)與染色

該菌為革蘭氏陽性短桿菌，大小約為0.5μmх1.0-2.0μm，直或稍彎，兩端鈍圓，常呈V字型排列，偶有球狀、雙球狀，兼性厭氧、無芽胞，一般不形成莢膜，但在營養(yǎng)豐富的環(huán)境中可形成莢膜，在陳舊培養(yǎng)中的菌體可呈絲狀及革蘭氏陰性，該菌有4根周毛和1根端毛，但周毛易脫落。

幼齡培養(yǎng)物為革蘭氏陽性，陳舊培養(yǎng)物可轉(zhuǎn)為革蘭氏陰性，呈兩極著色，易誤認(rèn)為雙球菌。

五、培養(yǎng)特性

該菌營養(yǎng)要求不高，在20-25℃培養(yǎng)有動力，穿刺培養(yǎng)2-5天可見倒立傘狀生長，肉湯培養(yǎng)物在顯微鏡下可見翻跟斗運(yùn)動。該菌的生長范圍為2-42℃（也有報(bào)道在0℃能緩慢生長），最適培養(yǎng)溫度為35--37℃，在pH中性至弱堿性（pH9.6）、氧分壓略低、二氧化碳張力略高的條件下該菌生長良好，在pH3.8-4.4能緩慢生長，在6.5% NaCl 肉湯中生長良好。在固體培養(yǎng)基上，菌落初始很小，透明，邊緣整齊，呈露滴狀，但隨著菌落的增大，變得不透明。在5-7%的血平板上，菌落通常也不大，灰白色，刺種血平板培養(yǎng)后可產(chǎn)生窄小的β-溶血環(huán)。在0.6%酵母浸膏胰酪大豆瓊脂（TSAYE）和改良Mc Bride（MMA）瓊脂上，用45角入射光照射菌落，通過解剖鏡垂直觀察，菌落呈蘭色、灰色或蘭灰色。

六、生化反應(yīng)

該菌觸酶陽性，氧化酶陰性，能發(fā)酵多種糖類，產(chǎn)酸不產(chǎn)氣，如發(fā)酵葡萄糖、乳糖、水楊素、麥芽糖、鼠李糖、七葉苷、蔗糖（遲發(fā)酵）、山梨醇、海藻糖、果糖，不發(fā)酵木糖、甘露醇、肌醇、阿拉伯糖、側(cè)金盞花醇、棉子糖、衛(wèi)矛醇和纖維二糖，不利用枸櫞酸鹽，40%膽汁不溶解，吲哚、硫化氫、尿素、明膠液化、硝酸鹽還原、賴氨酸、鳥氨酸均陰性，VP、甲基紅試驗(yàn)和精氨酸水解陽性。