淺析細(xì)菌不染色標(biāo)本檢查法

不染色標(biāo)本一般用于觀察細(xì)菌動(dòng)力及運(yùn)動(dòng)情況，因?yàn)椴蝗旧珮?biāo)本直接在普通光學(xué)顯微鏡下，不能清楚看到細(xì)菌的形態(tài)與結(jié)構(gòu)特征。細(xì)菌未染色時(shí)無(wú)色透明，在顯微鏡下主要靠細(xì)菌的折射率與周?chē)h(huán)境不同進(jìn)行觀察。有鞭毛的細(xì)菌在鏡下呈活潑有方向的運(yùn)動(dòng)，無(wú)鞭毛的細(xì)菌則呈不規(guī)則布朗運(yùn)動(dòng)。常用的方法有壓滴法、懸滴法。

1、實(shí)驗(yàn)材料
（1）菌種變形桿菌6—12h肉湯培養(yǎng)物、葡萄球菌6—12h肉湯培養(yǎng)物。
（2）玻片普通玻片、凹玻片、蓋玻片。
（3）其他吸管、酒精燈、接種環(huán)、凡士林等。

2、實(shí)驗(yàn)方法
（1）懸滴法
①取2張潔凈凹玻片，在凹窩四周涂少許凡士林。
②用接種環(huán)各取!環(huán)變形桿菌、葡萄球菌培養(yǎng)物分別置于兩片蓋玻片中央。
③將凹玻片倒合于蓋玻片上，使凹窩中央正對(duì)菌液。
④迅速翻轉(zhuǎn)載玻片，用小鑷子輕壓，使蓋玻片與凹窩邊緣粘緊封閉，以防水分蒸發(fā)。
⑤先用低倍鏡找到懸滴邊緣，再換高倍鏡，觀察時(shí)應(yīng)下降聚光器，縮小光圈，減少光亮，使背景較暗易于觀察。

（2）壓滴法
①用接種環(huán)取2—3環(huán)菌液置于潔凈載玻片中央。
②用小鑷子夾1塊蓋玻片輕輕覆蓋在菌液上，放置蓋玻片時(shí)應(yīng)注意，先將蓋玻片的一端接觸菌液，緩緩放下。以免產(chǎn)生氣泡。
③先用低倍鏡觀察，找到細(xì)菌所在部位后再換高倍鏡觀察，看細(xì)菌能否運(yùn)動(dòng)。

3、實(shí)驗(yàn)結(jié)果
變形桿菌有鞭毛，運(yùn)動(dòng)活潑，可向不同方向迅速運(yùn)動(dòng)。葡萄球菌無(wú)鞭毛，不能做真正運(yùn)動(dòng)，只能在一定范圍內(nèi)做位移不大的顫動(dòng)，這是受水分子撞擊而呈分子運(yùn)動(dòng)（布朗運(yùn)動(dòng)）。
檢查細(xì)菌動(dòng)力時(shí)需注意區(qū)分真正運(yùn)動(dòng)和分子運(yùn)動(dòng)，前者是由于細(xì)菌鞭毛引起的有方向性的位移。而后者是因水分子撞擊細(xì)菌而引起的布朗運(yùn)動(dòng)，只在原地顫動(dòng)，無(wú)鞭毛的細(xì)菌僅有此種分子運(yùn)動(dòng)。另外，需注意標(biāo)本片制好后應(yīng)盡快觀察，以免水分蒸發(fā)影響觀察結(jié)果。