昆蟲細胞是主要提取來自昆蟲的一類真核細胞。通過培養(yǎng)制造宿主的病毒,可以引起昆蟲流行病,但對人畜和植物無害,因而可作病毒殺蟲劑,還可以生產某些藥用蛋白。細胞培養(yǎng)瓶是培養(yǎng)昆蟲細胞常用的一種細胞培養(yǎng)耗材,那么在培養(yǎng)昆蟲細胞時需要注意哪些問題呢?
1、溫度與環(huán)境:昆蟲細胞一般應該在27℃、非濕化的環(huán)境中培養(yǎng),建議不要進行二氧化碳交換,所以細胞培養(yǎng)瓶盡量選擇密閉的蓋子。
2、培養(yǎng)基:不同細胞對培養(yǎng)基的需求也有所差異,應該根據細胞生長特性,選擇昆蟲細胞專用的培養(yǎng)基。
3、貼壁昆蟲細胞:細胞密度低于匯合狀態(tài)的20% 時,細胞生長會受到抑制。健康狀態(tài)的細胞是對數期收獲的細胞,所以在傳代時應選擇對數期進行。但是,如果培養(yǎng)的是強貼壁性昆蟲細胞,則應在細胞達到匯合狀態(tài)或者剛剛開始從培養(yǎng)瓶底部脫離時進行傳代,因為此時細胞容易脫離。
4、貼壁昆蟲細胞在無血清培養(yǎng)條件下,昆蟲細胞與基質貼附非常牢固,需要花費較大力氣才能使其脫落。要使細胞脫落,可以采用拍掌的動作快速振搖一下細胞培養(yǎng)瓶。為了避免污染,進行此操作前必須蓋緊蓋子。
5、懸浮培養(yǎng):一些昆蟲細胞系可能需要一定的過程來適應懸浮培養(yǎng)。進行細胞懸浮培養(yǎng)時無需更換培養(yǎng)基,定期傳代時需要吸出細胞懸液,然后加入適量培養(yǎng)基,將細胞稀釋到適當的密度。添加新鮮培養(yǎng)基后可使細胞營養(yǎng)素達到完全補充。
以上是細胞培養(yǎng)瓶培養(yǎng)昆蟲細胞需要注意的五個方面,此外還要注意盡量不要劇烈搖晃細胞培養(yǎng)瓶,避免對細胞造成損傷。