PCR與克隆載體構(gòu)建??

一、服務(wù)內(nèi)容

1、以基因組DNA，cDNA，質(zhì)粒，PCR產(chǎn)物等為模板擴(kuò)增目的基因

2、將目的基因連接至克隆載體上并測(cè)序

3、將目的基因連接至表達(dá)載體上并測(cè)序

4、表達(dá)載體的小試表達(dá)驗(yàn)證

5、表達(dá)產(chǎn)物SDS—PAGE或者WB鑒定（目前暫無其它鑒定）

6、Western blot檢測(cè)轉(zhuǎn)染質(zhì)粒的表達(dá)情況

7、表達(dá)蛋白體內(nèi)和體外功能研究

二、樣品要求（樣品處理及保存見附件）

1. 基因組DNA或cDNA＞1ug；質(zhì)粒＞100 ng；PCR產(chǎn)物＞100ug；

2. 也可提供細(xì)胞，組織，植物，血清等樣品由我們進(jìn)行核酸提取，具體樣品要求詳見熒光定量PCR服務(wù)項(xiàng)目；

三、客戶提供材料

1、細(xì)菌（無致病性）、細(xì)胞、植物、土壤等核酸提取的樣品；

2、質(zhì)粒、cDNA或基因組DNA等；

3、待轉(zhuǎn)染的細(xì)胞株

四、提交給客戶結(jié)果

1、克隆、表達(dá)質(zhì)粒和含有質(zhì)粒的甘油菌；

2、完整測(cè)序結(jié)果和堿基序列圖；

3、表達(dá)的蛋白；

4、完整實(shí)驗(yàn)報(bào)告。