M199液體培養(yǎng)基使用方法
2022-08-17 12:30 來源:上海遠(yuǎn)慕生物試劑
產(chǎn)品名稱:M199液體培養(yǎng)基
英文名稱:M199 Medium
供應(yīng)商:遠(yuǎn)慕生物
用途:本培養(yǎng)基最初專用于雞成纖維細(xì)胞的的營(yíng)養(yǎng)研究。如今,199培養(yǎng)基廣泛用于非轉(zhuǎn)化細(xì)胞、疫苗和病毒的研究以及上皮細(xì)胞的原代培養(yǎng)。
實(shí)驗(yàn)應(yīng)用:M199培養(yǎng)基具有廣泛的物種適用性,尤其適用于非轉(zhuǎn)化細(xì)胞的培養(yǎng)。用M199來培養(yǎng)小鼠胰腺上皮細(xì)胞和大鼠晶狀體組織細(xì)胞等細(xì)胞,通常都可以取得良好的實(shí)驗(yàn)效果。除用于細(xì)胞的體外培養(yǎng)以外,M199培養(yǎng)基還可以用于有關(guān)的病毒學(xué)研究以及疫苗生產(chǎn)。
產(chǎn)品特點(diǎn):與其他基礎(chǔ)培養(yǎng)基相比,M199培養(yǎng)基含有獨(dú)特的成分,包括腺嘌呤、腺苷、次黃嘌呤、胸腺嘧啶和其他維生素。本品含有EBSS,不含蛋白質(zhì)、脂類或生長(zhǎng)因子,使用時(shí)通常需要添加10%胎牛血清(FBS)。M199使用碳酸氫鈉緩沖系統(tǒng)(2.2g/L),因此需要5%-10%的二氧化碳環(huán)境來維持生理pH值。M199可與EBSS一起用于二氧化碳培養(yǎng)箱,或與HBSS一起用于不含二氧化碳的培養(yǎng)箱。
細(xì)胞培養(yǎng)基種類與基本成分
細(xì)胞培養(yǎng)基的種類很多,按其來源分為合成培養(yǎng)基和天然培養(yǎng)基(目前使用的培養(yǎng)基絕大部分是合成培養(yǎng)基),按其物質(zhì)狀態(tài)分為干粉培養(yǎng)基和液體培養(yǎng)基兩類。干粉培養(yǎng)基需由實(shí)驗(yàn)者自己配制并滅菌,液體培養(yǎng)基由專業(yè)商家提供,用戶可直接使用,非常方便。
碳水化合物
碳水化合物是細(xì)胞生長(zhǎng)主要能量來源,其中有的是合成蛋白質(zhì)和核酸的成分。主要有葡萄糖、核糖、脫氧核糖、丙酮酸鈉和醋酸等。
無機(jī)鹽
培養(yǎng)液中無機(jī)鹽的主要功能是幫助細(xì)胞維持滲透壓平衡。此外,通過提供鈉,鉀和鈣離子,幫助細(xì)胞調(diào)節(jié)細(xì)胞膜功能。培養(yǎng)液的滲透壓是一個(gè)非常重要的因素, 細(xì)胞通常可耐受260mOsm/kg ~320 mOsm/kg。標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)液的滲透壓在此范圍內(nèi)波動(dòng)。特別注意:向培養(yǎng)液中加入其它物質(zhì)有可能會(huì)明顯改變培養(yǎng)液的滲透壓,特別是溶于強(qiáng)酸或強(qiáng)堿中的物質(zhì)。向培養(yǎng)液中添加HEPES 時(shí)需按以下方法調(diào)節(jié)鈉離子濃度。
液體培養(yǎng)基應(yīng)于4℃冰箱避光保存,實(shí)驗(yàn)前放入37℃預(yù)熱。未加血清液體培養(yǎng)基有效期為12 個(gè)月。液體培養(yǎng)基中的L-谷氨酰胺會(huì)隨著儲(chǔ)存時(shí)間的延長(zhǎng)而慢慢分解。如果細(xì)胞生長(zhǎng)不良,可以再添加適量L-谷氨酰胺。