甘露醇發(fā)酵培養(yǎng)基實(shí)驗(yàn)方法

中文名稱：甘露醇發(fā)酵培養(yǎng)基
英文名稱：Mannitol Medium
供應(yīng)商：遠(yuǎn)慕生物
規(guī)格：250ml
用途:用于細(xì)菌甘露醇發(fā)酵試驗(yàn)（GB標(biāo)準(zhǔn)） 

成分(g/L) 
蛋白胨    10g 
牛肉浸粉    5g
甘露醇    10g 
氯化鈉      5g
溴麝香草酚藍(lán)   0.024g
PH值:7.4±0.1

甘露醇發(fā)酵培養(yǎng)基原理：
酪胨和酵母浸出粉提供碳氮源、維生素和生長(zhǎng)因子；葡萄糖提供可發(fā)酵有糖類更利于生長(zhǎng)；氯化鈉維持均衡的滲透壓；硫乙醇酸鈉和L—胱氨酸能有效降低氧化還原電位，防止過(guò)氧化物的積累對(duì)某些菌產(chǎn)生毒性，同時(shí)其硫氫基團(tuán)有鈍化含砷、汞及其它重金屬防腐劑的抑菌作用；少量瓊脂的凝固作用可防止二氧化碳、氧氣和還原產(chǎn)物的擴(kuò)散；刃天青是氧化還原指示劑，氧化狀態(tài)呈粉紅色，還原狀態(tài)無(wú)色。

儀器與試劑 ：
1.托盤(pán)天平、消毒鍋、電冰箱、1000ml三角瓶、500ml量筒、玻璃棒、棉塞、牛皮紙、線繩、培養(yǎng)皿。
2.蒸餾水、營(yíng)養(yǎng)瓊脂、75%酒精。

甘露醇發(fā)酵培養(yǎng)基操作方法
1.稱取營(yíng)養(yǎng)瓊脂17克，于1000ml三角瓶?jī)?nèi)，加入500ml純化水，充分?jǐn)嚢韬?，塞上棉塞?2.置消毒鍋內(nèi)，于115℃高壓滅菌30分鐘，取出放置至室溫后，放入冰箱，備用（冰箱溫度控制在1－4℃）。
3.使用時(shí)從冰箱取出，放置室溫后，置水浴中加熱，使融，全部融化后取出，放置約45℃時(shí)使用。
4.使用時(shí)，用75%乙醇擦瓶子外圍，打開(kāi)牛皮紙包扎外殼，在火焰附近慢慢旋下棉塞，左手拿培養(yǎng)皿，右手拿三角瓶，慢慢傾倒至培養(yǎng)皿中，每皿注入約15ml完畢后，將棉塞在火焰上方燒烤數(shù)秒，立即塞入瓶口，包上牛皮紙外層，用線繩扎好，留下次使用。（此瓶培養(yǎng)基只允許使用兩次，且每次首先傾注一個(gè)空白平皿作為對(duì)照培養(yǎng)）。