李斯特氏菌顯色培養(yǎng)基應用方法

產(chǎn)品名稱：李斯特氏菌顯色培養(yǎng)基
英文名稱：Listera Chromogenic Medium
供應商：遠慕生物
產(chǎn)品規(guī)格：100g
保質(zhì)期：二年
產(chǎn)品用途： 用于李斯特氏菌的顯色培養(yǎng)，單增李斯特氏菌顯藍色，外圍有一不透明環(huán)。

成份(g/L)
基礎培養(yǎng)基：
營養(yǎng)物質(zhì) 70.0
顯色劑 6.0
pH 7.2±0.2 25℃
此配方可以進行改良或增加營養(yǎng)成份以獲得的結(jié)果。

李斯特氏菌顯色培養(yǎng)基用法：稱取基礎培養(yǎng)基 14.2g 加入 180ml 蒸餾水，加熱溶解并不停攪拌；另取 1.2g 李斯特氏菌添加劑，加入 20ml 無菌水，并加入一些玻璃球，不停振動 1-2min，使其混合均勻，將二者分別于 121℃ 高壓滅菌 15 min。冷至 50℃ 左右時，把李斯特氏菌添加劑加入基礎培養(yǎng)基中，并加入復溶后的李斯特氏菌抑菌劑1 支，混勻，傾入無菌平皿。使培養(yǎng)基的厚度約為 2-3mm，這樣有利觀察不透明環(huán)。

李斯特氏菌顯色培養(yǎng)基操作步驟：
使用前，把制備好的培養(yǎng)基放置室溫 10-20 分鐘。
1、按SN標準、GB標準、FDA標準、ISO標準或其它標準制備樣品液；
2、把樣品液加入李氏增菌肉湯(LB1、LB2)中增菌；或把樣品液和Half-Fraser增菌液按照 1：10 的比例混勻，30℃ 培養(yǎng) 24 小時；或其它增菌液中增菌培養(yǎng);
3、取一環(huán)增菌液劃線接種到李斯特氏菌顯色培養(yǎng)基上，36℃±1℃ 培養(yǎng) 24-48 小時。

質(zhì)量控制
1、外觀
此干燥培養(yǎng)基的粉末均勻，具有良好的流動性，呈淡黃色。制備好的平板呈不透明乳白色培養(yǎng)基。
2、微生物試驗

質(zhì)控菌株	ATCC	生長情況	菌落顏色	不透明環(huán)
單增李斯特氏菌	19114	+++	藍色	+
綿羊李斯特氏菌	CICC21663	+++	藍色	+
斯氏李斯特氏菌	CICC21617	+++	藍色	-
金黃色葡萄球菌	25923	-	-	-
大腸埃希氏菌	25922	-	-	-
鼠傷寒沙門氏菌	14028	-	-	-
黑曲霉	16404	-	-	-

典型特征
單增李斯特氏菌 36℃±1℃ 培養(yǎng) 24-28 小時，平板上出現(xiàn)藍色菌落，菌落周圍有一不透明環(huán)。綿羊李斯特氏菌 36℃±1℃ 培養(yǎng) 48 小時，平板上出現(xiàn)藍色菌落，菌落周圍有一不透明環(huán)。斯氏李斯特氏菌 36℃±1℃ 培養(yǎng) 24-48 小時，平板上出現(xiàn)藍色菌落，菌落周圍沒有不透明環(huán)。在食品檢測中綿羊李斯特氏菌非常少見。

貯存
制備好的固體平板保存于2-8℃，應避免光線直接照射。干燥培養(yǎng)基應放置于陰暗干燥處， 保存溫度 2-8℃。

失效
干燥培養(yǎng)基超過保質(zhì)期、結(jié)塊和顏色變化都不能使用。

注意
此培養(yǎng)基僅供實驗室使用。