弧菌顯色培養(yǎng)基實(shí)驗(yàn)原理

產(chǎn)品名稱：弧菌顯色培養(yǎng)基
英文名稱：Vibrio Chromogenic Medium
供應(yīng)商：遠(yuǎn)慕生物
產(chǎn)品規(guī)格：100g
保質(zhì)期：二年
產(chǎn)品用途：用于弧菌的顯色培養(yǎng)，副溶血性弧菌顯藍(lán)綠色，霍亂弧菌和創(chuàng)傷弧菌顯紫紅色，溶藻弧菌顯淡黃色或米黃色。

簡介：弧菌顯色培養(yǎng)基用于食品、海產(chǎn)品、病人糞便樣品和水產(chǎn)品中副溶血性弧菌的快速檢測。副溶血性弧菌顯藍(lán)綠色且菌落比較大，霍亂弧菌和創(chuàng)傷弧菌顯紫紅色，溶藻弧菌顯淡黃色或米黃色；其它細(xì)菌絕大部分被抑制。本培養(yǎng)基的特異性高，可以克服TCBS培養(yǎng)基引起的假陰性結(jié)果，是一種很理想的快速檢測培養(yǎng)基。

成份(g/L)
特殊營養(yǎng)物質(zhì)  75.0
混合顯色劑  4.45
瓊脂  15.0
pH 8.6±0.1  25℃
此配方可以進(jìn)行改良或增加營養(yǎng)成份以獲得最佳的結(jié)果。 

用法
稱取本品 18.9g 加入 200ml 蒸餾水，加熱溶解并不停攪拌，煮沸3-5次。冷卻至 45-50℃ 時(shí)，傾入無菌平皿。
注意：制備好的培養(yǎng)基表面不能太干燥。

原理
利用弧菌自身代謝產(chǎn)生的酶與相應(yīng)顯色底物反應(yīng)使菌落顯色，以區(qū)分目標(biāo)菌與非目標(biāo)菌。顯色底物是由產(chǎn)色因子和微生物部分可代謝物質(zhì)組成，在特異性酶作用下，游離出產(chǎn)色因子使菌落顯示一定顏色。

操作步驟
1、按國家標(biāo)準(zhǔn)、SN標(biāo)準(zhǔn)、FDA標(biāo)準(zhǔn)或其它方法制備樣品液；
2、取 1ml 樣品液加入 9ml SCPB肉湯或堿性蛋白胨水中，36±1℃ 增菌培養(yǎng) 18-24 小時(shí)；
3、用 3mm 接種環(huán)取 1 環(huán)增菌液，劃線接種到弧菌顯色培養(yǎng)基上，做 2 個(gè)平板；
4、36±1℃培養(yǎng) 18-24h，副溶血性弧菌顯藍(lán)綠色，菌落比較大；霍亂弧菌和創(chuàng)傷弧菌顯紫紅色，溶藻弧菌顯淡黃色或米黃色，其它細(xì)菌絕大部被抑制；
5、對可疑菌落可劃線接種到營養(yǎng)瓊脂平板上，36±1℃ 培養(yǎng) 12-16 小時(shí)，挑取單菌落做副溶血性弧菌全套生化試驗(yàn)。

質(zhì)量控制
1、外觀
此干燥培養(yǎng)基的粉末均勻，具有良好的流動性，呈淡黃色。制備好的平板呈淡粉色至黃色固體培養(yǎng)基。
2、微生物試驗(yàn)
在36±1℃培養(yǎng)18-24h小時(shí)

質(zhì)控菌株	菌株編號	生長情況	菌落顏色
副溶血性弧菌	ATCC 17802	+++	藍(lán)綠色，菌落比較大
金黃色葡萄球菌	ATCC 25923	-	-
大腸桿菌	ATCC 25922	-	-
溶藻弧菌	ATCC 17749	+++	淡黃色或米黃色
非01群霍亂弧菌		+++	紫紅色
創(chuàng)傷弧菌	ATCC 27562	+++	紫紅色

方法的局限性
本培養(yǎng)基不能直接鑒定霍亂弧菌，副溶血性弧菌的特異性可達(dá) 95%，準(zhǔn)確性非常高，有時(shí)可能需做其它補(bǔ)充試驗(yàn)。

典型特征
典型副溶血性弧菌顯藍(lán)綠色且菌落比較大，霍亂弧菌和創(chuàng)傷弧菌顯紫紅色，溶藻弧菌顯淡黃色或米黃色

貯存
制備好的平板可保存 2-5 天，應(yīng)避免光線直接照射。干燥培養(yǎng)基應(yīng)放置于陰暗干燥處， 保存溫度 2-8℃，注意避光保存。

失效
干燥培養(yǎng)基超過保質(zhì)期、結(jié)塊和顏色變化都不能使用。

注意
此培養(yǎng)基僅供實(shí)驗(yàn)室使用。