微生物學(xué)檢驗(yàn)培養(yǎng)基質(zhì)量控制的意義

 目前，作為我國(guó)現(xiàn)行食品安全標(biāo)準(zhǔn)體系配套的強(qiáng)制性標(biāo)準(zhǔn)《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品微生物學(xué)檢驗(yàn)》(GB?4789系列)都是以傳統(tǒng)微生物學(xué)培養(yǎng)為基礎(chǔ)的經(jīng)典檢驗(yàn)方法。培養(yǎng)基及相關(guān)配套試劑是微生物學(xué)常規(guī)檢驗(yàn)方法必須采用的生化試劑，培養(yǎng)基及試劑質(zhì)量會(huì)直接影響到檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，因此，必須做好培養(yǎng)基及試劑的質(zhì)量控制。涉及食品微生物學(xué)檢驗(yàn)的培養(yǎng)基種類(lèi)繁多。近年來(lái)，隨著市場(chǎng)經(jīng)濟(jì)的發(fā)展，商品化培養(yǎng)基的應(yīng)用越來(lái)越普及。基于種種原因，它們的配方、用途、使用方法、保存方式各不相同，為實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制帶來(lái)新問(wèn)題。
  培養(yǎng)基和試劑質(zhì)量控制的要求

在中國(guó)國(guó)家認(rèn)證認(rèn)可監(jiān)督管理委員會(huì)發(fā)布的《檢驗(yàn)檢測(cè)機(jī)構(gòu)資質(zhì)認(rèn)定評(píng)審準(zhǔn)則》4.5.6條款中，規(guī)定“檢驗(yàn)檢測(cè)機(jī)構(gòu)應(yīng)建立和保持選擇和購(gòu)買(mǎi)對(duì)檢驗(yàn)檢測(cè)質(zhì)量有影響的服務(wù)和供應(yīng)品的程序。明確服務(wù)、供應(yīng)品、試劑、消耗材料的購(gòu)買(mǎi)、驗(yàn)收、存儲(chǔ)的要求”，就是要求“在中華人民共和國(guó)境內(nèi)，向社會(huì)出具具有證明作用的數(shù)據(jù)、結(jié)果的檢驗(yàn)檢測(cè)機(jī)構(gòu)”為保證采購(gòu)物品和相關(guān)服務(wù)的質(zhì)量，應(yīng)當(dāng)按制定的程序?qū)υ噭┻M(jìn)行有效的控制和管理，以保證檢驗(yàn)檢測(cè)結(jié)果的質(zhì)量[5]。雖然文件有規(guī)定，但是，具體如何執(zhí)行，需要檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)結(jié)合自身實(shí)際情況制定程序性文件。2013版標(biāo)準(zhǔn)只是食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)，適用范圍僅限于食品微生物學(xué)檢驗(yàn)領(lǐng)域，而目前其他微生物學(xué)檢驗(yàn)領(lǐng)域并沒(méi)有適用的培養(yǎng)基和試劑質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)，所以，建議所有涉及微生物學(xué)檢驗(yàn)領(lǐng)域的檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)都執(zhí)行或參照?qǐng)?zhí)行2013版標(biāo)準(zhǔn)，制定適合本實(shí)驗(yàn)室的培養(yǎng)基和試劑質(zhì)量控制程序性文件。

2013版標(biāo)準(zhǔn)的具體要求和存在問(wèn)題

術(shù)語(yǔ)和定義

本章節(jié)主要缺陷是定義描述不到位和前后術(shù)語(yǔ)不一致。同時(shí)，遺漏了診斷血清、測(cè)試紙片、生化鑒定試劑盒等常用微生物檢驗(yàn)試劑。另外，標(biāo)準(zhǔn)將培養(yǎng)基和試劑分為11類(lèi)，分類(lèi)方法與ISO?11133分為6類(lèi)有所不同，例如，將選擇性計(jì)數(shù)培養(yǎng)基分為選擇性固體計(jì)數(shù)培養(yǎng)基和選擇性液體計(jì)數(shù)培養(yǎng)基，明顯就是畫(huà)蛇添足。

缺少“設(shè)備和儀器”

作為一個(gè)既有檢驗(yàn)方法又有判定依據(jù)的標(biāo)準(zhǔn)，缺少對(duì)于設(shè)備和儀器的規(guī)定，是不可想象的。

培養(yǎng)基及試劑質(zhì)量保證

這個(gè)章節(jié)分為證明文件、貯存、培養(yǎng)基的實(shí)驗(yàn)室制備、培養(yǎng)基的使用、培養(yǎng)基的棄置五個(gè)部分。建議檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)按照這個(gè)框架規(guī)定培養(yǎng)基和試劑的質(zhì)量控制程序。這個(gè)章節(jié)存在的問(wèn)題，主要是對(duì)培養(yǎng)基保質(zhì)期規(guī)定太松、配制用水電阻率錯(cuò)誤、pH測(cè)定溫度不適用、培養(yǎng)基的棄置可操作性不強(qiáng)，而目前現(xiàn)場(chǎng)評(píng)審時(shí)，實(shí)驗(yàn)室被核查到的常見(jiàn)錯(cuò)誤，除了培養(yǎng)基配制原始記錄信息不全這個(gè)通病外，幾乎所有實(shí)驗(yàn)室都沒(méi)有做到“傾注瓊脂量達(dá)到3?mm以上厚度”，屬于未認(rèn)真學(xué)習(xí)標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定。

質(zhì)控菌株的保藏及使用

這個(gè)章節(jié)，除了使用術(shù)語(yǔ)與第二章規(guī)定不一致外，最重要的問(wèn)題是描述和規(guī)定不夠詳盡，也未考慮生物安全相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)要求，因此，與CNAS—CL09：2013、GB?4789.1—2016《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)?食品微生物學(xué)檢驗(yàn)?總則》、GB?19489—2008等其他實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制管理規(guī)定要求不一致[2，6，7]，容易理解錯(cuò)誤。

培養(yǎng)基和試劑的質(zhì)量要求

1.基本要求

本條規(guī)定供應(yīng)商和制備者應(yīng)進(jìn)行培養(yǎng)基和試劑的20℃～25℃的pH和緩沖能力特性評(píng)估，前者與標(biāo)準(zhǔn)全文都在25℃測(cè)定pH的規(guī)定不符，后者則是全文都沒(méi)有出現(xiàn)如何檢驗(yàn)、如何判定的描述。

2.微生物學(xué)要求

概論規(guī)定實(shí)驗(yàn)室應(yīng)“制定驗(yàn)收程序，如需進(jìn)行驗(yàn)證，可按6.2執(zhí)行”。對(duì)此條款，目前，多數(shù)檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)并未理解，除了沒(méi)有制定明確的培養(yǎng)基和試劑驗(yàn)收程序外，也不知道哪些培養(yǎng)基和試劑需要進(jìn)行驗(yàn)證。其實(shí)，就是有第三方檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)檢驗(yàn)報(bào)告判定“達(dá)到附錄D質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)的要求”的，以及對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果沒(méi)有直接影響的培養(yǎng)基和試劑，不需要驗(yàn)證。在“5.2.3.2測(cè)試菌株”條，使用了與第四章“質(zhì)控菌株”不一樣的術(shù)語(yǔ)。這個(gè)條款中，規(guī)定了根據(jù)培養(yǎng)基和試劑類(lèi)型的不同，采用的測(cè)試菌株數(shù)量。在現(xiàn)場(chǎng)評(píng)審時(shí)，常見(jiàn)評(píng)審員要求實(shí)驗(yàn)室必須使用附錄E里面的全部菌株進(jìn)行測(cè)試或?qū)嶒?yàn)室僅用一株菌株進(jìn)行選擇性培養(yǎng)基測(cè)試等情況，都屬于對(duì)標(biāo)準(zhǔn)理解錯(cuò)誤。

培養(yǎng)基和試劑性能測(cè)試方法

總體來(lái)說(shuō)，2016版標(biāo)準(zhǔn)考慮到我國(guó)中小型實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行全部培養(yǎng)基和試劑驗(yàn)證的工作量，并未一味照搬國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)的要求，人性化規(guī)定了實(shí)驗(yàn)室可以使用半定量和定性測(cè)試方法驗(yàn)證培養(yǎng)基和試劑，有利于實(shí)驗(yàn)室執(zhí)行并開(kāi)展。不足之處是，本章節(jié)文字、語(yǔ)法及描述性錯(cuò)誤太多，影響了標(biāo)準(zhǔn)的實(shí)施效果。

測(cè)試結(jié)果的記錄

7.1條要求“培養(yǎng)基制造商或供應(yīng)商應(yīng)按客戶(hù)的要求提供培養(yǎng)基常規(guī)信息和相關(guān)測(cè)試菌株生長(zhǎng)特性信息?！迸c3.1.1條“生產(chǎn)企業(yè)提供的文件”屬于重復(fù)規(guī)定。

7.2條要求“按照質(zhì)量體系的要求，對(duì)所有培養(yǎng)基性能測(cè)試的數(shù)據(jù)歸檔并在有效期內(nèi)進(jìn)行適當(dāng)?shù)谋４??！睂?shí)際上，任何質(zhì)量控制體系都沒(méi)有規(guī)定必須對(duì)所有培養(yǎng)基進(jìn)行性能測(cè)試，用于輔助檢驗(yàn)用的培養(yǎng)基，如，菌種保存、實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部環(huán)境監(jiān)控的那些培養(yǎng)基并不強(qiáng)制進(jìn)行性能測(cè)試，只要對(duì)關(guān)鍵性培養(yǎng)基和試劑進(jìn)行驗(yàn)證即可。