O157顯色培養(yǎng)基檢驗(yàn)原理

產(chǎn)品名稱：O157顯色培養(yǎng)基
英文名稱：O157 chromogenic medium
供應(yīng)商：遠(yuǎn)慕生物
規(guī)格： 100g
保質(zhì)期：三年
用途：用于O157菌的顯色培養(yǎng)，O157菌顯亮紅色、淡紅色或紅色
備注：需添加CT添加劑

簡(jiǎn)介：大腸桿菌O157：H7顯色培養(yǎng)基用于食品、病人糞便樣品中O157：H7菌的快速檢測(cè)。O157：H7菌顯亮紅色、淡紅色或紅色，菌落周圍沒(méi)有藍(lán)色暈圈，大腸桿菌和大腸菌群顯暗藍(lán)色、藍(lán)色或紫色，菌落周圍有藍(lán)色暈圈；其它細(xì)菌顯藍(lán)色、黃色或無(wú)色。本培養(yǎng)基的特異性高，可以克服SMAC培養(yǎng)基引起的假陽(yáng)性和假陰性結(jié)果，是一種很理想的快速檢測(cè)培養(yǎng)基。

成份(g/L)
特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì) 68.4
混合顯色劑  2.6
瓊脂 15.0
pH7.0±0.1  25℃ 
CT添加劑  1ml/支*5（已配套，無(wú)需另購(gòu)）
此配方可以進(jìn)行改良或增加營(yíng)養(yǎng)成份以獲得最/佳的結(jié)果。

用法
稱取本品 17.2g 加入 200ml 蒸餾水，加熱煮沸溶解并不停攪拌，加熱 2 分鐘左右。冷卻至 45-50℃ 時(shí)，加入一支CT添加劑混勻，傾入無(wú)菌平皿。
注意：制備好的培養(yǎng)基一定要保持表面干燥，可在 36℃ 的培養(yǎng)箱中倒置放置 1-2 小時(shí)。

原理
利用大腸桿菌O157 自身代謝產(chǎn)生的酶與相應(yīng)顯色底物反應(yīng)使菌落顯色，以區(qū)分目標(biāo)菌與非目標(biāo)菌。顯色底物是由產(chǎn)色因子和微生物部分可代謝物質(zhì)組成，在特異性酶作用下，游離出產(chǎn)色因子使菌落顯示一定顏色。

操作步驟
1、按國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)、SN標(biāo)準(zhǔn)、FDA標(biāo)準(zhǔn)或其它方法制備樣品液；
2、取 25 克樣品液加入 225ml  mEC肉湯或mTSB肉湯中，36℃ 增菌培養(yǎng) 18-24 小時(shí)；
3、用 3mm 接種環(huán)取 1 環(huán)增菌液，劃線接種到O157菌顯色培養(yǎng)基上，做 2 個(gè)平板；
4、36℃ 培養(yǎng) 18-24h，O157:H7菌顯亮紅色、淡紅色或紅色，菌落周圍沒(méi)有藍(lán)色暈圈；大腸桿菌和大腸菌群顯暗藍(lán)色、藍(lán)色或紫色，菌落周圍有藍(lán)色暈圈；其它細(xì)菌顯藍(lán)色、黃色或無(wú)色；
5、對(duì)典型菌落可做O157:H7菌血清學(xué)試驗(yàn)和全套生化試驗(yàn)。
注：必須在 36℃ 培養(yǎng) 24 小時(shí)內(nèi)判讀結(jié)果，以免菌落顏色發(fā)生變化。

質(zhì)量控制
1、外觀
此干燥培養(yǎng)基的粉末均勻，具有良好的流動(dòng)性，呈灰白色。制備好的平板呈藍(lán)色固體培養(yǎng)基。
2、微生物試驗(yàn)
在 36℃ 培養(yǎng) 18-24h 小時(shí)：

質(zhì)控菌株	ATCC	生長(zhǎng)情況	菌落顏色
大腸桿菌O157	35150	+++	亮紅色
金黃色葡萄球菌	25923	-/+	黃色或無(wú)色
大腸桿菌	25922	+/-	暗藍(lán)色，菌落周圍有藍(lán)色暈圈
沙門氏菌	14028	+++	藍(lán)色
奇異變形桿菌	12453	+/-	無(wú)色
肺炎克雷伯氏菌	10031	+/-	藍(lán)色，菌落周圍有藍(lán)色暈圈
弗氏檸檬酸鹽桿菌	43864	+/-	藍(lán)色菌落有紫色中心，菌落周圍有藍(lán)色暈圈
坂崎桿菌	29004	++	紫色至藍(lán)色

方法的局限性
本培養(yǎng)基上的典型大腸桿菌O157:H7必須做血清學(xué)試驗(yàn)或生化試驗(yàn)。

典型特征
典型大腸桿菌O157:H7菌顯亮紅色、淡紅色或紅色，菌落周圍沒(méi)有藍(lán)色暈圈；大腸桿菌和大腸菌群顯藍(lán)色或紫色，菌落周圍有藍(lán)色暈圈；其它細(xì)菌顯藍(lán)色、黃色或無(wú)色；

貯存
制備好的平板可保存 2-5 天，應(yīng)避免光線直接照射。干燥培養(yǎng)基應(yīng)放置于陰暗干燥處， 保存溫度 2-8℃，注意避光保存。

失效
干燥培養(yǎng)基超過(guò)保質(zhì)期、結(jié)塊和顏色變化都不能使用。

注意
此培養(yǎng)基僅供實(shí)驗(yàn)室使用。