TBX培養(yǎng)基檢驗(yàn)方法

產(chǎn)品名稱：TBX培養(yǎng)基
英文名稱：TBX Agar
供應(yīng)商：遠(yuǎn)慕生物
產(chǎn)品規(guī)格：100g
保質(zhì)期：二年
產(chǎn)品用途：用于快速、準(zhǔn)確檢測大腸桿菌，培養(yǎng)24小時(shí)，大腸桿菌顯藍(lán)綠色

TBX培養(yǎng)基是遠(yuǎn)慕生物公司改良的培養(yǎng)基，用于食品、水、牛奶、冰激凌和肉制品中大腸桿菌的快速檢測。大腸桿菌顯藍(lán)綠色，大腸菌群顯無色，其它菌顯黃色或無色，革蘭氏陽性菌被抑制。

成分（g/L）:
特殊營養(yǎng)物質(zhì)  21.4 
顯色劑  0.2 
瓊脂  15.0 
PH6.8±0.2  25℃
此配方可以進(jìn)行改良或增加營養(yǎng)成份以獲得最/佳的結(jié)果。

用法：
稱取本品36. 6g加入1000ml蒸餾水，加熱溶解并不停攪拌，煮沸不要超過1分鐘。分裝三角瓶，121℃ 高壓滅菌15分鐘。取1ml制備好的樣品液加入直徑為9cm無菌平皿中心，傾入冷卻至45- 50°C培養(yǎng)基約15ml，混勻，凝固后， 36士1℃倒置18~24h?；蚶鋮s至45°C-50°C時(shí)，傾入無菌平皿，瓊脂完全凝固后， 在超凈工作臺(tái)中開蓋吹15- 30分鐘，去掉培養(yǎng)基表面水汽，加入適當(dāng)稀釋度的樣品液1ml， 涂布于培養(yǎng)基上，36士1°C 培養(yǎng)18~24h。

檢驗(yàn)原理：
特殊營養(yǎng)物質(zhì)提供微生物生長所需的碳氮源和微量元素，維持均衡的滲透壓，并提供針對(duì)革蘭氏陽性細(xì)菌的選擇性，特別是桿菌和糞鏈球菌；顯色劑是由發(fā)色團(tuán)和微生物部分可代謝物質(zhì)組成，在特異性酶靶定作用下，游離出產(chǎn)色因子用于合成細(xì)胞使菌落顯示顏色。在TBX培養(yǎng)基上，大腸桿菌菌落顯藍(lán)綠色，其它菌顯黃色或無色。

操作步驟：
1、按國家標(biāo)準(zhǔn)、SN標(biāo)準(zhǔn)、FDA標(biāo)準(zhǔn)或其它方法制備樣品液;
2、取樣品液1ml加入冷卻至45- -50°C 顯色培養(yǎng)基中混勻或涂布于平板上;
3、36+1C培養(yǎng)18~24h,選用有30~~200個(gè)菌落的平板，計(jì)數(shù)平板上出現(xiàn)的典型大腸桿菌菌落。大腸桿菌典型菌落為藍(lán)綠色，其它細(xì)菌為無色或黃色菌落。總大腸桿菌=藍(lán)綠色菌落;
4、對(duì)可疑大腸桿菌菌落可劃線接種到營養(yǎng)瓊脂平板上, 36+1C 培養(yǎng)12- 16小時(shí)，挑取單菌落做大腸桿菌全套生化試驗(yàn)(遠(yuǎn)慕有生化鑒定管套裝4種x4套)。

質(zhì)量控制：
1、外觀
此干燥培養(yǎng)基的粉末均勻，具有良好的流動(dòng)性，呈乳白色。制備好的平板呈無色透明固體。
2 、微生物試驗(yàn)在 36 ±1℃ 培養(yǎng)18～24h小時(shí):

質(zhì)控菌株	ATCC	生長情況	菌落顏色
單增李氏菌	19114	-/+	無色
金黃色葡萄球菌	25923	-/+	無色
大腸桿菌	25922	+++	藍(lán)綠色
沙門氏菌	14028	+++	無色
產(chǎn)氣腸桿菌	35029	+++	無色
陰溝腸桿菌	23355	+++	無色

方法的局限性：
本培養(yǎng)基鑒定大腸菌群大腸桿菌，少數(shù)情況下可能會(huì)出現(xiàn)假陽性，但不會(huì)出現(xiàn)假陰性，有時(shí)可能需做其它補(bǔ)充試驗(yàn)。

典型特征：
大腸桿菌典型菌落為藍(lán)綠色，大腸菌群為無色菌落，其它細(xì)菌為無色或黃色菌落。

貯存：
制備好的平板應(yīng)立即使用，應(yīng)避免光線直接照射。干燥培養(yǎng)基應(yīng)放置于陰暗干燥處，保存溫度2-8C，注意避光保存。

失效：
干燥培養(yǎng)基超過保質(zhì)期、結(jié)塊和顏色變化都不能使用。

注意：
此培養(yǎng)基僅供實(shí)驗(yàn)室使用。

TBX培養(yǎng)基的微生物靈敏度試驗(yàn):
按標(biāo)簽用法制備培養(yǎng)基，接種以下質(zhì)控菌株，放置36±1℃需氧培養(yǎng)18-24小時(shí)。
注：回收率計(jì)算時(shí)，用TSA瓊脂做對(duì)照培養(yǎng)基。