大腸桿菌／大腸菌群顯色培養(yǎng)基說(shuō)明書(shū)

產(chǎn)品名稱(chēng)：大腸桿菌／大腸菌群顯色培養(yǎng)基

英文名稱(chēng)：E.Coli/Coliform Chromogenic Medium

供應(yīng)商：遠(yuǎn)慕生物

產(chǎn)品規(guī)格：100g

保質(zhì)期：2年

用途：用于快速、準(zhǔn)確同時(shí)檢測(cè)大腸桿菌和大腸菌群，培養(yǎng)24小時(shí)，大腸桿菌顯藍(lán)綠色-紫色,大腸菌群顯紅色。

 

簡(jiǎn)介

大腸桿菌/大腸菌群顯色培養(yǎng)基(第二代)是青島海博生物公司再次改良的培養(yǎng)基，用于食品、水、牛奶、冰激凌和肉制品中大腸桿菌和大腸菌群的快速檢測(cè)。大腸桿菌顯藍(lán)色至紫色，大腸菌群顯紅色，革蘭氏陽(yáng)性菌被抑制。

 

成份(g/L)

特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì) 33.0

顯色劑 0.3

瓊脂 13.0

pH 7.0±0.2  25℃

此配方可以進(jìn)行改良或增加營(yíng)養(yǎng)成份以獲得最佳的結(jié)果。

 

用法

稱(chēng)取本品 46.3g 加入 1000ml 蒸餾水，加熱溶解并不停攪拌，煮沸不要超過(guò) 1 分鐘。取1ml制備好的樣品液加入直徑為 9cm 無(wú)菌平皿中心，傾入冷卻至 45-50℃ 培養(yǎng)基約 15ml，混勻，凝固后，再加入一層培養(yǎng)基進(jìn)行履蓋。

或冷卻至 45-50℃ 時(shí),傾入無(wú)菌平皿,瓊脂完全凝固后,在 37℃ 的培養(yǎng)箱中倒置放置 1-2 小時(shí),加入適當(dāng)稀釋度的樣品液 1ml,涂布于培養(yǎng)基上,36℃ 培養(yǎng) 18～24h。

 

操作步驟

1、按國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)、SN標(biāo)準(zhǔn)、FDA標(biāo)準(zhǔn)或其它方法制備樣品液;

2、取樣品液 1ml 加入冷卻至 45-50℃ 顯色培養(yǎng)基中混勻或涂布于平板上;

3、36℃培養(yǎng) 18～24h，選用有 30～200 個(gè)菌落的平板，計(jì)數(shù)平板上出現(xiàn)的典型大腸菌群和大腸桿菌菌落。大腸桿菌典型菌落為藍(lán)色至紫色，大腸菌群為粉紅色菌落，其它細(xì)菌為無(wú)色或黃色菌落 ;總大腸菌群=藍(lán)色菌落+紫色菌落+粉紅色菌落   大腸桿菌=藍(lán)色菌落+紫色菌落;

4、對(duì)可疑大腸桿菌菌落可劃線接種到營(yíng)養(yǎng)瓊脂平板上，36℃ 培養(yǎng) 12-16 小時(shí)，挑取單菌落做大腸桿菌全套生化試驗(yàn)(遠(yuǎn)慕生物有生化鑒定管套裝 4種x4套)。

 

質(zhì)量控制

1、外觀

此干燥培養(yǎng)基的粉末均勻，具有良好的流動(dòng)性，呈乳白色至淡粉紅色。制備好的平板呈無(wú)色半透明固體培養(yǎng)基，稍有些沉淀物。

2、微生物試驗(yàn)

在 36℃ 培養(yǎng) 18～24h 小時(shí)：

質(zhì)控菌株	ATCC	生長(zhǎng)情況	菌落顏色
金黃色葡萄球菌	25923	-/+	無(wú)色
大腸桿菌	25922	+++	藍(lán)色
沙門(mén)氏菌	14028	+++	無(wú)色
陰溝腸桿菌	23355	+++	粉紅色
產(chǎn)氣腸桿菌	35029	+++	粉紅色
弗氏檸檬酸鹽桿菌	43864	+++	粉紅色
肺炎克雷伯氏菌	10031	+++	粉紅色

 

方法的局限性

本培養(yǎng)基鑒定大腸菌群/大腸桿菌，少數(shù)情況下可能會(huì)出現(xiàn)假陽(yáng)性，但不會(huì)出現(xiàn)假陰性，有時(shí)可能需做其它補(bǔ)充試驗(yàn)。

 

典型特征

大腸桿菌典型菌落為藍(lán)色至紫色，大腸菌群為粉紅色菌落，其它細(xì)菌為無(wú)色菌落。

 

貯存

制備好的平板應(yīng)立即使用，應(yīng)避免光線直接照射。干燥培養(yǎng)基應(yīng)放置于陰暗干燥處， 保存溫度 2-8℃，注意避光保存。

 

失效

干燥培養(yǎng)基超過(guò)保質(zhì)期、結(jié)塊和顏色變化都不能使用。

 

注意

此培養(yǎng)基僅供實(shí)驗(yàn)室使用。

 

大腸桿菌/大腸菌群顯色培養(yǎng)基（第二代）的微生物靈敏度試驗(yàn):

 

按標(biāo)簽用法制備培養(yǎng)基，接種以下質(zhì)控菌株，放置36±1℃需氧培養(yǎng)18-24小時(shí)。

注：回收率計(jì)算時(shí)，用TSA瓊脂做對(duì)照培養(yǎng)基。