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細菌總數(shù)顯色培養(yǎng)基實驗說明書

2022-06-09 15:07 來源:上海遠慕生物試劑
產(chǎn)品名稱:細菌總數(shù)顯色培養(yǎng)基
英文名稱:Total Genes Chromogenic Medium
供應商:遠慕生物
產(chǎn)品規(guī)格:250g
保質期:三年
用途:用于快速、準確檢測細菌總數(shù),培養(yǎng)24小時,細菌顯紅色

配方(g/L):
特殊營養(yǎng)物質8.4
顯色劑  0.1
瓊脂 15.0
pH 6.9-7.1  25℃
此配方可以進行改良或增加營養(yǎng)成份以獲得最佳的結果。  

用法
稱取本品 23.5 克,加熱溶解于 1000ml 蒸餾水中,分裝,121℃ 高壓滅菌 15 分鐘,冷卻至 45-50℃ 待用;

傾注法:
取適當稀釋度的樣品液 1ml 加入無菌平皿中,再加入冷卻好的培養(yǎng)基約 15ml,混合均勻,待培養(yǎng)基完全凝固后,36℃ 培養(yǎng) 24~48h 進行計數(shù);

涂布法:
取冷卻至 45-50℃ 培養(yǎng)基,傾入無菌平皿,待培養(yǎng)基完全凝固后,在 36℃ 的培養(yǎng)箱中倒置放置 1-2 小時,加入適當稀釋度的樣品液 1ml,涂布于培養(yǎng)基上,36℃培養(yǎng) 24~48h 進行計數(shù)。

操作步驟
1、按國家標準、SN標準、FDA標準或其它方法制備樣品液;
2、取樣品液 1ml 加入冷卻至 45-50℃ 顯色培養(yǎng)基中混勻或涂布于平板上;
3、36℃ 培養(yǎng) 24~48h,選用有 30~200 個菌落的平板,計數(shù)平板上出現(xiàn)的紅色菌落(不論其大小和顏色深淺均計數(shù))。

質量控制
1、外觀
此干燥培養(yǎng)基的粉末均勻,具有良好的流動性,呈乳白色。制備好的平板呈透明無色固體或淡粉色培養(yǎng)基。
2、微生物試驗
在 36℃ 培養(yǎng) 24-48h:
  1.  質控菌株
  1.  ATCC
  1.  生長情況
  1.  菌落顏色
  1. 單增李斯特氏菌
  1. 19114
  1. +++
  1. 紅色
  1. 金黃色葡萄球菌
  1.  25923
  1. +++
  1.  紅色
  1. 大腸埃希氏菌
  1.  25922
  1. +++
  1.  紅色
  1.  沙門氏菌
  1.  14028
  1. +++
  1.  紅色
  1. 肺炎克雷伯氏菌
  1.  10031
  1.  +++
  1.  紅色
方法的局限性
本培養(yǎng)基用于菌落總數(shù)計數(shù)時,有些菌落可能會顯無色,但都應計數(shù)在總數(shù)內(nèi)。

典型特征
典型菌落為紅色至淡紅色。

貯存
制備好的平板應立即使用,應避免光線直接照射。干燥培養(yǎng)基應放置于陰暗干燥處, 保存溫度 2-8℃,注意避光保存。

失效
干燥培養(yǎng)基超過保質期、結塊和顏色變化都不能使用。

注意
此培養(yǎng)基僅供實驗室使用。
細菌總數(shù)顯色培養(yǎng)基微生物靈敏度試驗:

按標簽用法制備培養(yǎng)基,接種以下質控菌株,放置36±1℃需氧培養(yǎng)24-48小時。
注:回收率計算時,用TSA瓊脂做對照培養(yǎng)基。
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