防止和清除核酸污染假陽(yáng)性，關(guān)鍵點(diǎn)在哪里？

核酸檢測(cè)技術(shù)有諸多優(yōu)點(diǎn)，但由于其超高的靈敏度，一旦實(shí)驗(yàn)室出現(xiàn)核酸污染，很容易導(dǎo)致假陽(yáng)性結(jié)果，從而影響檢測(cè)的準(zhǔn)確性。樣本處理環(huán)節(jié)抽提核酸和檢測(cè)環(huán)節(jié)擴(kuò)增產(chǎn)物泄露均會(huì)導(dǎo)致核酸污染，飛濺的擴(kuò)增產(chǎn)物會(huì)形成氣溶膠漂浮在空氣中，粘附到物體表面及檢測(cè)人員身體 上，隨著人員及物料流動(dòng)而污染整個(gè)實(shí)驗(yàn)室。實(shí)驗(yàn)室一旦發(fā)生核酸污染極難清除，會(huì)造成實(shí)驗(yàn)室短期內(nèi)無(wú)法開(kāi)展工作，因此防范和清除核酸污染是分子檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室的工作重點(diǎn)。

目前的核酸檢測(cè)均采用閉管檢測(cè)以防止開(kāi)蓋形成氣溶膠，同時(shí)采取嚴(yán)格的物理隔絕法，檢測(cè)依次分為試劑準(zhǔn)備區(qū)-樣本準(zhǔn)備區(qū)-擴(kuò)增區(qū)-產(chǎn)物檢測(cè)區(qū)，且逐級(jí)壓，這些策略都最大程度地防止了氣溶膠污染，但核酸污染事故依然時(shí)有發(fā)生。由于核酸檢測(cè)步驟較多，且多個(gè)環(huán)節(jié)樣本直接暴露于空氣中，任何一個(gè)環(huán)節(jié)出現(xiàn)一點(diǎn)小紕漏就容易導(dǎo)致整個(gè)實(shí)驗(yàn)室的污染。即使嚴(yán)格按照規(guī)程操作，核酸污染依然無(wú)法徹底避免。

核酸污染主要體現(xiàn)在樣本核酸或擴(kuò)增產(chǎn)物在臺(tái)面、設(shè)備、檢測(cè)人員表面的核酸殘留，以及擴(kuò)增產(chǎn)物形成的氣溶膠。氣溶膠由于顆粒較小，若不做處理可長(zhǎng)期漂浮在空氣中持續(xù)影響實(shí)驗(yàn)室的檢測(cè)。

核酸實(shí)驗(yàn)室污染的主要原因有：①標(biāo)本污染； ②試劑污染；③ 產(chǎn)物污染；④ 設(shè)備污染；⑤ 其他污染。

其解決措施 為：

①標(biāo)本污染：重新采樣進(jìn)行檢測(cè)，評(píng)估標(biāo)本前處理環(huán)節(jié)；

②試劑污染：更換新的試劑重新檢測(cè)評(píng)估；

③設(shè)備污染：設(shè)備整體消毒清潔、維護(hù)；

④產(chǎn)物污染：全面清潔消毒實(shí)驗(yàn)室、儀器設(shè)備所有實(shí)驗(yàn)有關(guān)用品。

發(fā)現(xiàn)污染，檢測(cè)工作應(yīng)立即停止，直到確認(rèn)消除污染后才能重新開(kāi)始檢測(cè)。首先，要查找污染源和明確污染范圍。然后，根據(jù)污染源和污染范圍采取有效的去污染措施，結(jié)合各種不同方法以達(dá)到最佳效果。

實(shí)驗(yàn)室污染的處理：

1.標(biāo)本污染生物安全柜的操作臺(tái)造成局限污染時(shí)：

立即用吸水紙覆蓋，并使用0.55%含氯消毒劑進(jìn)行噴灑消毒。消毒液需要現(xiàn)用現(xiàn)配，24小時(shí)內(nèi)使用。

2.標(biāo)本傾覆造成實(shí)驗(yàn)室污染時(shí)：

保持實(shí)驗(yàn)室空間密閉，避免污染物擴(kuò)散。立即使用潤(rùn)濕有0.55%含氯消毒劑的毛巾覆蓋污染區(qū)。必要時(shí)（如大量溢撒時(shí)）可用過(guò)氧化氫加熱熏蒸實(shí)驗(yàn)室，劑量為2g/m?，熏蒸過(guò)夜；或20g/L過(guò)氧乙酸消毒液用氣溶膠噴霧器噴霧，用量8ml/m?，作用1-2小時(shí)；

3.清理污染物時(shí)：

嚴(yán)格遵循活病毒生物安全操作要求，采用壓力蒸汽滅菌處理，并進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室換氣等，防止次生危害。