鐵對(duì)體外的細(xì)胞培養(yǎng)非常重要。它作為一些酶的輔因子,參與了細(xì)胞的多種生理功能,其中至少有如下三個(gè)重要方面:
01、參與細(xì)胞的呼吸代謝
線粒體是細(xì)胞氧化代謝的部位和能量中樞,其中,線粒體膜上的琥珀酸脫氫酶扮演著關(guān)鍵角色。鐵即是琥珀酸脫氫酶的一部分,參與細(xì)胞的氧化代謝和能量生成。
02、保護(hù)細(xì)胞不受氧化損傷
鐵作為鐵卟啉結(jié)構(gòu)的核心,是過(guò)氧化氫酶和過(guò)氧化物酶等酶的關(guān)鍵組成部分,能消除過(guò)氧化氫和酚類、胺類、醛類的毒性,使細(xì)胞免于遭受H2O?等過(guò)氧化物帶來(lái)的損傷,為細(xì)胞提供抗氧化防御,使細(xì)胞更健康。
03、提高細(xì)胞密度和存活率
鐵是細(xì)胞增殖所必需的元素。如果沒(méi)有鐵,細(xì)胞就不能在增殖時(shí)從G1期進(jìn)入到S期。缺鐵會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞凋亡和死亡。如果缺乏鐵, 細(xì)胞復(fù)制時(shí)DNA合成將受到影響。因?yàn)殍F是RNA聚合酶所必需,它也是核糖核苷酸還原酶的組成部分。而核糖核苷酸還原酶是細(xì)胞在合成DNA過(guò)程中,將核糖核苷酸轉(zhuǎn)變成脫氧核糖核苷酸的限速酶。已知有藥廠已開(kāi)發(fā)鐵配方專利,用于加入到細(xì)胞培養(yǎng)基中,以提高細(xì)胞密度和存活。
對(duì)于無(wú)血清培養(yǎng)基,鐵也是一種重要的補(bǔ)充劑。有研究顯示,在無(wú)血清培養(yǎng)基中,鐵能誘導(dǎo)LI 210細(xì)胞生長(zhǎng)。并且它不依賴轉(zhuǎn)鐵蛋白的存在。
在將鐵強(qiáng)化小牛血清作為胎牛血清(FCS)的替代品方面,從1988年以來(lái),已陸續(xù)有一些相關(guān)報(bào)道,如對(duì)于一些細(xì)胞系,鐵強(qiáng)化小牛血清在促細(xì)胞生長(zhǎng)或克隆率方面,等效或優(yōu)于FCS(13)。對(duì)于牛肌源細(xì)胞,在DMEM/M199培養(yǎng)基中添加鐵強(qiáng)化小牛血清,在細(xì)胞增殖速率方面,優(yōu)于胎牛血清、新生牛血清和馬血清(8)。在CHO細(xì)胞的HGPRT基因突變?cè)囼?yàn)中(該實(shí)驗(yàn)常用于化學(xué)物的遺傳毒性檢測(cè)),在倍增時(shí)間和克隆率方面,補(bǔ)鐵型小牛血清和FCS沒(méi)有顯著差異,補(bǔ)鐵型小牛血清完全可以取代FCS,從而降低實(shí)驗(yàn)成本(9)。
值得指出的是,鐵強(qiáng)化牛血清的使用效果與細(xì)胞類型和所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基關(guān)系密切。在一項(xiàng)細(xì)胞長(zhǎng)期生長(zhǎng)的比較研究中,發(fā)現(xiàn)鐵強(qiáng)化小牛血清性能不如FCS,但優(yōu)于小牛血清
因此,使用鐵強(qiáng)化牛血清,可以預(yù)期,其性能必然優(yōu)于普通牛血清。
中文品名:鐵強(qiáng)化新生牛血清
英文品名:Newborn Calf Serum(Iron Fortified)
注:英文品名以質(zhì)控證書(shū)為準(zhǔn)
品牌:Ausbian
規(guī)格:500ml/瓶
批號(hào):見(jiàn)包裝標(biāo)簽
用途:用于細(xì)胞培養(yǎng)
Ausbian?鐵強(qiáng)化新生牛血清產(chǎn)自澳洲,是在當(dāng)?shù)卣F醫(yī)部門(mén)的監(jiān)督下從注冊(cè)的出口屠場(chǎng)采集,符合國(guó)際動(dòng)物協(xié)會(huì)要求。
血清經(jīng)0.22μm濾膜過(guò)濾,確保血清品質(zhì),確保無(wú)細(xì)菌和支原體污染。濾膜材料符合美國(guó)藥典規(guī)定的生物安全性標(biāo)準(zhǔn)。
添加微量元素鐵(目前批次鐵濃度為226mg/dl),滿足細(xì)胞對(duì)鐵離子需求,促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)。
極低內(nèi)毒素。內(nèi)毒素<5EU/ml(目前批次為1.71EU/ml),使細(xì)胞更健康,使客戶做實(shí)驗(yàn)更加順利。
血清經(jīng)嚴(yán)格檢測(cè),每個(gè)批次提供完整的質(zhì)控報(bào)告。檢測(cè)項(xiàng)目包括鐵含量、pH值、滲透壓、血紅蛋白、總蛋白、無(wú)菌檢查、支原體檢查、病毒檢查、促細(xì)胞生長(zhǎng)試驗(yàn)(細(xì)胞密度、克隆率、倍增時(shí)間)等。