實驗室常用的2種黃酮類化合物的提取方法

黃酮類化合物的提取，主要是根據(jù)被提取物質(zhì)的性質(zhì)和提取過程伴隨的雜質(zhì)是否容易除去來選擇適當?shù)奶崛∪軇?br>
黃酮苷類和極性較大的苷元，如羥基黃酮、雙黃酮、橙酮、查耳酮等，一般可用丙酮、乙酸乙酯、乙醇、甲醇、水或極性較大的混合溶劑提取，其中用得最多的是甲醇—水(1：1)或甲醇。多糖苷類則可用沸水提取，以破壞水解酶的活性，避免苷類水解，例如從槐花米中提取蘆丁。在提取花青素類化合物時，可加入少量酸，如0.1%鹽酸，但提取一般黃酮苷類成分時不應加酸，以避免發(fā)生水解。黃酮苷元的提取宜選用極性較小的溶劑，如氯仿、乙醚、乙酸乙酯等。對于極性小的多甲氧基黃酮苷元，也可用苯進行提取。

對于得到的粗提取液，可進一步回收溶劑濃縮成浸膏后，再用溶媒萃取、堿提酸沉淀、大孔吸附樹脂、超臨界流體萃取、超聲波等方法初步精制。
 
1．溶劑萃取法

利用黃酮類化合物與混入的雜質(zhì)極性不同，選擇不同的溶劑進行萃取，不僅可以使黃酮類化合物與雜質(zhì)分離，還可以使苷類與苷元或極性苷元與非極性苷元相互分離。例如植物葉子的醇浸提液，用石油醚萃取，可以除去葉綠素和胡蘿卜素等脂溶性色素；水提取液濃縮后加入3-4倍量的乙醇，可以沉淀除去蛋白質(zhì)、多糖等水溶性雜質(zhì)。

有時溶劑萃取過程也可以用逆流分配法連續(xù)進行。常用的溶劑系統(tǒng)有：水—醋酸乙酯、正丁醇—石油醚等。

2．堿提酸沉淀法

黃酮類化合物分子中大多數(shù)都含有酚羥基，顯弱酸性，易溶于堿性水而難溶于酸性水，因此可以用堿性水溶液（如飽和石灰水、5%碳酸鈉或稀氫氧化鈉溶液等）或堿性稀醇來提取。提取液加酸酸化后，黃酮類化合物即可沉淀析出。

在用堿提酸沉法進行提取純化時，應當注意所用堿濃度不宜過高，以免在強堿條件下，尤其在加熱時破壞黃酮母核；在加酸酸化時，酸性也不宜過強，以免生成詳鹽，致使析出的黃酮類化合物又重新溶解，降低產(chǎn)品得率；當原料中含有大量果膠、黏液質(zhì)等水溶性雜質(zhì)時，如花、果實等原料，宜用石灰乳或石灰水代替其他堿性水溶液進行提取，以使上述含羧基的雜質(zhì)生成鈣鹽沉淀而不被溶出，更有利于黃酮類化合物的純化處理。

此法簡便易行、經(jīng)濟安全，如蘆丁、橙皮苷、黃芩苷的提取均應用此方法。從槐花米中提取蘆丁的操作過程為：槐花米加約6倍量水，煮沸，在攪拌下緩緩加入石灰乳至pH8~9。在此pH條件下微沸20—30min，趁熱抽濾；濾渣再加4倍水煎煮1次，趁熱抽濾。合并濾液在60-70℃下，用濃鹽酸調(diào)pH至5，攪勻，靜置24h，抽濾。沉淀物水洗至中性，60℃干燥得蘆丁粗品，并于水中重結(jié)晶，70-80℃干燥得蘆丁純品。