關(guān)于標(biāo)樣的純度分析 所有答案都在這了！

目前，多數(shù)實(shí)驗(yàn)室的標(biāo)準(zhǔn)品都是購(gòu)于廠家生產(chǎn)的，很少是自制標(biāo)準(zhǔn)品。價(jià)格相對(duì)較昂貴，如果擔(dān)心質(zhì)量不合格再自行測(cè)定純度的話，又增加了成本，很多人認(rèn)為沒(méi)必要，況且標(biāo)準(zhǔn)品買回來(lái)有時(shí)候只有一丟丟。今天呢，咱們先不討論買的標(biāo)準(zhǔn)品需不需要都進(jìn)行純度測(cè)定，咱們就只討論一旦要進(jìn)行純度測(cè)定，應(yīng)該怎么做。

常見(jiàn)的純度分析方法

純度是其成為標(biāo)準(zhǔn)品的重要指標(biāo)之一。常見(jiàn)的純度分析方法有：高效液相色譜法、氣相色譜法、分光光度法、滴定法和質(zhì)量平衡法等方法。但這些方法除了各自有其適用范圍之外，最大的問(wèn)題在于都需要有純度或含量準(zhǔn)確的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)作為參比，才能給出未知物純度的信息。

差示掃描量熱（DSC）測(cè)定物質(zhì)濃度的方法具有操作簡(jiǎn)單，不需要標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)等優(yōu)點(diǎn)，只要物質(zhì)純度達(dá)到98%以上，即可通過(guò)對(duì)該物質(zhì)的DSC曲線進(jìn)行適當(dāng)處理給出其純度信息。該方法已廣泛應(yīng)用于金屬、合金等無(wú)機(jī)物純度鑒定，因大多數(shù)有機(jī)化合物存在著受熱分解的問(wèn)題，DSC法純度檢測(cè)收到限制。

標(biāo)準(zhǔn)品的純度測(cè)定主要有以下兩種

1.直接測(cè)定

用液相的峰面積歸一法，這樣測(cè)不是很科學(xué)。比如說(shuō)你采用254nm的波長(zhǎng)檢測(cè)，有些雜質(zhì)在這個(gè)波長(zhǎng)處的響應(yīng)值很低，這樣這些雜質(zhì)的量即使很高也不會(huì)在圖譜上顯示出來(lái)，得出的面積歸一化結(jié)果也不可信。用液相測(cè)注意兩點(diǎn)：1.波長(zhǎng)的選擇，盡可能的選擇短波長(zhǎng)。2.濃度的選擇，也是盡可能選擇高濃度，不然就是有雜質(zhì)，你的機(jī)器也看不見(jiàn)！直接測(cè)定法還有直接滴定和對(duì)照品法以及內(nèi)標(biāo)法等。

2.間接測(cè)定

間接測(cè)定是首先知道它的雜質(zhì)的含量是多少，我們?cè)匍g接測(cè)定樣品的含量。簡(jiǎn)單的說(shuō)就是：

純度＝100％-雜質(zhì)含量％

雜質(zhì)通常包括水分、無(wú)機(jī)雜質(zhì)（比如硫酸鹽、氯化物等）、有機(jī)殘留等。

Q&A：由于標(biāo)準(zhǔn)品是自己分離獲得，所以需要測(cè)定其純度。用DAD檢測(cè)器測(cè)其純度，可能不準(zhǔn)，有人建議用LC-MS測(cè)定，那么如何測(cè)定呢？

1. 配同等濃度的溶液，用已知含量的標(biāo)準(zhǔn)品標(biāo)定自己純化標(biāo)準(zhǔn)品的純度。標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)MS離子化后，檢測(cè)的主要色譜峰即為目標(biāo)化合物的色譜峰，水分、重金屬、其他結(jié)構(gòu)的雜質(zhì)即使保留時(shí)間一樣也不會(huì)出峰干擾，結(jié)果比較可靠。

2. LC-MS進(jìn)樣后檢測(cè)總離子流，有機(jī)雜質(zhì)可以產(chǎn)生色譜峰，該色譜峰在保留時(shí)間上與目標(biāo)化合物色譜峰的保留時(shí)間會(huì)有差別，從而可以觀察標(biāo)準(zhǔn)品的純度問(wèn)題。一些在DAD上不響應(yīng)的雜質(zhì)，在MS上會(huì)出峰，從而使測(cè)定的結(jié)果更準(zhǔn)確。但也存在一個(gè)問(wèn)題，不同化合物離子化效率不同，同樣的濃度會(huì)產(chǎn)生不同的峰面積。

LC-MS可以測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)品的純度，但必須有對(duì)照品進(jìn)行比較，用已知含量的標(biāo)準(zhǔn)品外標(biāo)法確定自己標(biāo)準(zhǔn)品的量值，然后換算成純度，屬于外標(biāo)法定量的一種，主要能避免DAD測(cè)定純度過(guò)程中雜質(zhì)帶來(lái)的干擾。

其實(shí)使用LC/MS技術(shù)也不能保證準(zhǔn)確測(cè)定純度，LC/MS測(cè)定由于會(huì)受所采用離子化技術(shù)的限制。樣品中某些雜質(zhì)可能在所使用離子化技術(shù)下不能離子化或者離子化效率很低，導(dǎo)致該雜質(zhì)不能檢測(cè)到，測(cè)定純度無(wú)法實(shí)現(xiàn)，當(dāng)然如果所測(cè)雜質(zhì)和主成分相關(guān)，一般可采用與主成分相同的離子化方法，結(jié)合適合的色譜分離方法測(cè)定。

要做高效液相，最近買了四個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品，有兩個(gè)的純度只有91.7%和96.5%，會(huì)不會(huì)太低了，能不能做?。?br>
從ISO指南和國(guó)標(biāo)工作導(dǎo)則來(lái)看，標(biāo)準(zhǔn)品的特性是：

性質(zhì)均勻：由于標(biāo)準(zhǔn)品是每一批次生產(chǎn)的，從中抽樣進(jìn)行分析定值，再裝瓶。所以標(biāo)準(zhǔn)品必須性質(zhì)均勻，使同一批次的產(chǎn)品在標(biāo)定的性質(zhì)和值方面是一致的。只有當(dāng)這個(gè)條件滿足時(shí)，證書(shū)上的數(shù)值對(duì)客戶所使用的產(chǎn)品才是有意義的。

定值準(zhǔn)確：標(biāo)準(zhǔn)品由于用于做為測(cè)量的標(biāo)準(zhǔn)，其特性或值必須是非常準(zhǔn)確的。這和一般的試劑是不一樣的。試劑的含量定值通常是一個(gè)比較寬松的范圍，如大于98％等。而標(biāo)準(zhǔn)品的含量不僅僅是高，而且生產(chǎn)商對(duì)標(biāo)準(zhǔn)品的定值負(fù)責(zé)，保證標(biāo)準(zhǔn)品的值在證書(shū)定值的一定范圍以內(nèi)。因此，標(biāo)準(zhǔn)品的特點(diǎn)不在于含量高，而在于定值準(zhǔn)。即使某些標(biāo)準(zhǔn)品由于技術(shù)上面的原因純度較低，如低于90％，只要其定值準(zhǔn)，仍是合格的標(biāo)準(zhǔn)品。 不確定度的范圍小。

證書(shū)：標(biāo)準(zhǔn)品的證書(shū)上一般包含需要定值的信息，如化學(xué)物質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)品包括含量等。