細(xì)胞貼壁的六問(wèn)六答

1.細(xì)胞在體外培養(yǎng)時(shí)應(yīng)該貼壁嗎？

答：大部分來(lái)自實(shí)體組織器官的細(xì)胞會(huì)貼壁。它們?cè)跈C(jī)體內(nèi)時(shí)，也是與其他細(xì)胞或者細(xì)胞外基質(zhì)結(jié)合的。一般一種細(xì)胞具有一種特定的功能，不同種細(xì)胞有機(jī)組合在一起，就能構(gòu)成協(xié)同完成某些功能的器官1。

2. 細(xì)胞貼壁的原理是什么？

答：貼壁的過(guò)程可能是這樣的：細(xì)胞首先分泌細(xì)胞外基質(zhì)，這種細(xì)胞外基質(zhì)黏附在支持物的表面（如培養(yǎng)瓶、培養(yǎng)皿的底面）。細(xì)胞通過(guò)其表面的黏附因子與這些細(xì)胞外基質(zhì)結(jié)合。所以細(xì)胞貼壁與否與細(xì)胞本身分泌細(xì)胞外基質(zhì)的能力以及細(xì)胞本身表達(dá)的黏附分子的數(shù)量有關(guān)，也與培養(yǎng)皿壁的表面結(jié)構(gòu)有關(guān)1。培養(yǎng)基中的黏附蛋白也會(huì)摻入到細(xì)胞外基質(zhì)中。

例如，曾有人用胎牛血清培養(yǎng)大鼠腎臟細(xì)胞，發(fā)現(xiàn)大鼠腎臟細(xì)胞形成的外基質(zhì)層中，除了有腎臟細(xì)胞自身合成的纖黏連蛋白外，也含有胎牛血清中的纖黏連蛋白2。

又有人培養(yǎng)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞（MSCs），發(fā)現(xiàn)鈷60照射過(guò)的塑料培養(yǎng)瓶（照射劑量6Gy）能促進(jìn)貼壁，其效果和IV型膠原包被的培養(yǎng)瓶相同。這可能與射線改變了培養(yǎng)瓶壁的表面結(jié)構(gòu)有關(guān)3。

3. 貼壁有什么好處嗎？

答：貼壁對(duì)維持細(xì)胞的良好形態(tài)和促進(jìn)細(xì)胞的增殖有益處。有人培養(yǎng)許旺細(xì)胞，發(fā)現(xiàn)貼壁良好的細(xì)胞，其增殖率也較高4。人的造血干細(xì)胞培養(yǎng)，更是需要有貼壁細(xì)胞構(gòu)成“造血微環(huán)境”。有人發(fā)現(xiàn)這些貼壁細(xì)胞包括成纖維細(xì)胞，巨噬細(xì)胞，上皮樣細(xì)胞，脂肪細(xì)胞，它們交錯(cuò)連接，構(gòu)成網(wǎng)狀支架結(jié)構(gòu)5，6。

4. 對(duì)于某些懸浮細(xì)胞,能促進(jìn)它貼壁嗎？

答：有人介紹過(guò)一種使懸浮的肝癌細(xì)胞貼壁的方法，即采用多聚賴氨酸浸泡過(guò)的蓋玻片，放置到培養(yǎng)瓶中，可使懸浮的肝癌細(xì)胞貼壁7。包被過(guò)其他細(xì)胞外基質(zhì)的載體表面，也可促進(jìn)細(xì)胞黏附。

5、不同細(xì)胞外基質(zhì)對(duì)細(xì)胞粘附的效果一樣嗎？

答：不會(huì)完全一樣。具體看是哪種細(xì)胞。軟骨細(xì)胞對(duì)II型膠原的黏附性較好；上皮細(xì)胞在Ⅳ型膠原底物上貼壁良好，而在I、II、III型膠原底物的培養(yǎng)板上貼壁情況較差。纖黏連蛋白能夠加速成纖維細(xì)胞貼壁，但對(duì)表皮細(xì)胞、晶狀體上皮細(xì)胞和乳-腺上皮細(xì)胞貼壁則無(wú)此作用4。

6、牛血清對(duì)細(xì)胞粘附有作用嗎？

答：有。牛血清中含有玻連蛋白、纖黏連蛋白，對(duì)細(xì)胞粘附都有促進(jìn)作用8。需注意，熱滅活小牛血清會(huì)降低血清對(duì)細(xì)胞粘附的促進(jìn)作用，尤其在細(xì)胞旋轉(zhuǎn)培養(yǎng)時(shí)更為明顯9