微生物大小的測(cè)定實(shí)驗(yàn) 遠(yuǎn)慕技術(shù)√

微生物細(xì)胞大小，是微生物的形態(tài)特征之一，也是分類鑒定的依據(jù)之一。由于菌體很小，只能在顯微鏡下測(cè)量。用來(lái)測(cè)量微生物細(xì)胞大小的工具有目鏡測(cè)微尺和鏡臺(tái)測(cè)微尺。

實(shí)驗(yàn)方法原理     
鏡臺(tái)測(cè)微尺是中央部分刻有精確等分線的載玻片。一般將1 mm 等分為100格（或2 mm等分為200格），每格長(zhǎng)度等于0.01 mm（即106 μm）。是專用于校正目鏡測(cè)微尺每格長(zhǎng)度的。目鏡測(cè)微尺是一塊可放在接目鏡內(nèi)的隔板上的圓形小玻片，其中央刻有精確的刻度，有等分50小格或100小格兩種，每5小格間有一長(zhǎng)線相隔。由于所用接目鏡放大倍數(shù)和接物鏡放大倍數(shù)的不同，目鏡測(cè)微尺每小格所代表的實(shí)際長(zhǎng)度也就不同，因此，目鏡測(cè)微尺不能直接用來(lái)測(cè)量微生物的大小，在使用前必須用鏡臺(tái)測(cè)微尺進(jìn)行校正，以求得在一定放大倍數(shù)的接目鏡和接物鏡下該目鏡測(cè)微尺每小格的相對(duì)值，然后才可用來(lái)測(cè)量微生物的大小。

實(shí)驗(yàn)材料     
枯草芽孢桿菌染色玻片標(biāo)本
試劑、試劑盒     
香柏油
儀器、耗材     
目鏡測(cè)微尺 鏡臺(tái)測(cè)微尺 顯微鏡 擦鏡紙

實(shí)驗(yàn)步驟     
1.  目鏡測(cè)微尺的標(biāo)定

（1）放置目鏡測(cè)微尺取出接目鏡，旋開(kāi)接目鏡透鏡，將目鏡測(cè)微尺的刻度朝下放在接目鏡筒內(nèi)的隔板上，然后旋上接目透鏡，最后將此接目鏡插入鏡筒內(nèi)。

（2）放置鏡臺(tái)測(cè)微尺將鏡臺(tái)測(cè)微尺置于顯微鏡的載物臺(tái)上，使刻度面朝上。

（3）校正目鏡測(cè)微尺先用低倍鏡觀察，對(duì)準(zhǔn)焦距，當(dāng)看清鏡臺(tái)測(cè)微尺后，轉(zhuǎn)動(dòng)接目鏡，使目鏡測(cè)微尺的刻度與鏡臺(tái)測(cè)微尺的刻度平行，移動(dòng)推動(dòng)器，使目鏡測(cè)微尺和鏡臺(tái)測(cè)微尺的某一區(qū)間的兩對(duì)刻度線完全重合，然后計(jì)數(shù)出兩對(duì)重合線之間各自所占的格數(shù)。

根據(jù)計(jì)數(shù)得到的目鏡測(cè)微尺和鏡臺(tái)測(cè)微尺重合線之間各自所占的格數(shù)，通過(guò)如下公式換算出目鏡測(cè)微尺每小格所代表的實(shí)際長(zhǎng)度。



同法校正在高倍鏡和油鏡下目鏡測(cè)微尺每小格所代表的長(zhǎng)度。

2.  菌體大小的測(cè)定
目鏡測(cè)微尺校正后，移去鏡臺(tái)測(cè)微尺，換上枯草芽孢桿菌染色玻片標(biāo)本，校正焦距使菌體清晰，轉(zhuǎn)動(dòng)目鏡測(cè)微尺（或轉(zhuǎn)動(dòng)染色標(biāo)本），測(cè)出枯草芽孢桿菌的長(zhǎng)和寬各占幾小格，將測(cè)得的格數(shù)乘以目鏡測(cè)微尺每小格所代表的長(zhǎng)度，即可換算出此單個(gè)菌體的大小值，在同一涂片上需測(cè)定10至20個(gè)菌體，求出其平均值，才能代表該菌的大小。而且一般是用對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的菌體來(lái)進(jìn)行測(cè)定。

3.  取出目鏡測(cè)微尺，將接目鏡放回鏡筒，再將目鏡測(cè)微尺和鏡臺(tái)測(cè)微尺分別用擦鏡紙擦拭后，放回盒內(nèi)保存。
 
4.  結(jié)果
（1）將目鏡測(cè)微尺校正結(jié)果填入下表。

（2）在高倍鏡下測(cè)量枯草芽孢桿菌大小結(jié)果填入下表。