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酵母計數(shù)和活性怎么測? 用它!

2020-07-01 9:52 來源:上海遠慕生物試劑

酵母菌簡介:

酵母菌是基因克隆實驗中常用的真核生物細胞,也是食品工藝中常用的微生物,如釀酒酵母。

酵母菌細胞寬度(直徑)約2~6μm,長度5~30μm,有的則更長,個體形態(tài)有球狀、卵圓、橢圓、柱狀和香腸狀等。由于其尺寸較小,形狀不規(guī)則,因此采用明場法無法進行準確的計數(shù),更不易進行酵母活性的檢測!

?采用雙熒光通道設計的細胞計數(shù)儀,可更加準確地進行細胞計數(shù)和細胞活性分析。


接下來我們看一下它是如何進行酵母計數(shù)和活性檢測的吧?

步驟一:FDA/PI染色

取1?l FDA試劑、1?l PI試劑加入到18?l酵母菌液中,避光孵育10min。

FDA/PI試劑染色原理介紹:FDA是一種非熒光性疏水性熒光素衍生物,它可以穿透細胞膜進入細胞,通過細胞內酯酶催化水解二乙酸酯基團產(chǎn)生具有高熒光強度的熒光素。因此活細胞具有綠色熒光。無活性的死細胞被PI著色,發(fā)出紅色熒光。因此,可以很好的辨別死細胞與活細胞,準確的進行細胞活性的檢測。

步驟二:上樣

用移液槍吸取10?l 樣品加入到細胞計數(shù)板中。

將細胞計數(shù)板插入到LUNA FL中。

步驟三:檢測

直接點擊內置的酵母檢測App

在明場下進行調節(jié)焦距,然后點擊Count即開始細胞檢測,30秒內即可完成。

步驟四:結果查看、分析、導出

結果查看:

我們可以得到Total /Live /Dead細胞數(shù)量、細胞活性、細胞平均尺寸等數(shù)據(jù)。

結果分析:

我們可以設置細胞分析的尺寸范圍以及聚團情況等。

結果導出:

點擊Save/Print即可將結果導出,您可以選擇保存3個通道的原始圖片、加了Tag的圖片、包含了該次檢測所有信息的PDF文件。
 

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