識破各種污染，遠(yuǎn)慕生物拯救您的細(xì)胞

小伙伴們遇到過這種情況嗎？

當(dāng)您的課題進(jìn)行到白熱化程度時

卻發(fā)現(xiàn)細(xì)胞被污染了

此時大家的心情可謂五味雜陳

形容一下就是

問君能有幾多愁，眼淚恰似一江春水向東流

不過，別擔(dān)心

遠(yuǎn)慕生物煉就火眼金睛

幫助大家識破各種污染，拯救您的細(xì)胞

 

 

我們先來看看污染的真面目，總結(jié)下來無非以下幾種類型：

我們一起來分析它們的特征：

 

 

1

真菌-深藏不露

 

真菌之所以深藏不露，是因為它們一般不會導(dǎo)致培養(yǎng)基變渾濁，所以在污染早期，很難發(fā)現(xiàn)它們的蹤跡。直到長到一定規(guī)模后在鏡下可觀察到分叉細(xì)絲狀的菌絲（有些呈管狀，樹枝狀，串珠狀的菌絲）（如圖1，圖2）。這類污染中，為首的污染代表是酵母菌：顯微鏡下常見成串的珠狀物，形態(tài)呈卵形，大約比細(xì)胞小5~10倍，當(dāng)其進(jìn)行出芽生殖時，會聚集成連體結(jié)構(gòu)；爆發(fā)污染嚴(yán)重時，會造成培養(yǎng)基pH值改變，不易除去。

 

 

圖1. 真菌污染                                                    圖2. 真菌污染

 

 

2

細(xì)菌-屢見不鮮

 

細(xì)菌種類繁多，分布廣泛，是最容易污染細(xì)胞的微生物。

 

 

 

圖3. 細(xì)菌污染

 

 

3

支原體-無孔不入

 

 

如下圖所示：

 

圖4. 支原體污染

 

 

 

4

黑膠蟲-神秘莫測

 

 

 

5

病毒-專一任性

圖5. 感染之前 圖6. 感染24小時后

 

 

 

6

細(xì)胞交叉污染-玉石難分

細(xì)胞交叉污染之所以“玉石難分”是因為其長相和實驗所養(yǎng)的目的細(xì)胞形態(tài)相似，難以分辨。對于細(xì)胞株的交叉污染，曾有文獻(xiàn)報道統(tǒng)計，目前使用的細(xì)胞株大約有15~20%不是科學(xué)家們所認(rèn)為的細(xì)胞，而在生物醫(yī)藥領(lǐng)域中，細(xì)胞來源和細(xì)胞株身份鑒定檢測的觀念是普遍缺乏的。

細(xì)胞株的交叉污染，常因不經(jīng)意的實驗疏忽（不同細(xì)胞株分盤時，共享一瓶培養(yǎng)基；槍頭、移液管忘記更換，而造成不同細(xì)胞株之間的混合污染；實驗操作人員錄入錯誤細(xì)胞株名稱；傳代時的培養(yǎng)皿；冷凍細(xì)胞時的凍存管）而發(fā)生，繼而造成后續(xù)數(shù)據(jù)搜集錯誤。

目前大部分的科學(xué)期刊都已有“細(xì)胞相關(guān)實驗論文發(fā)表前，均需附上細(xì)胞鑒定報告”的規(guī)定（可查閱：文章發(fā)表前要求提供細(xì)胞鑒定的雜志），以此保證數(shù)據(jù)來源的正確性。

那么如何鑒別呢？細(xì)胞身份驗證方式：短串聯(lián)重復(fù)序列（STR）、同功酶分析、染色體組分型、擴(kuò)增片段長度多態(tài)性（AFLP）的特征分析等方法。其中STR，是目前國際細(xì)胞庫（包括：ATCC、DSMZ或是JCRB）常用于細(xì)胞株身份鑒定方法。

 

☆ 溫馨提示，至少每半年一次進(jìn)行細(xì)胞鑒定，理想情況每2-3個月鑒定一次，且課題開展前最好先確認(rèn)使用的細(xì)胞身份。