影響酶促反應的因素--溫度、PH和抑制劑

酶的zui適溫度不是一個常數(shù)，與作用時間長短有關。測定酶活性均在酶促反應zui適溫度下進行。大多數(shù)動物來源的酶zui適溫度為37-40℃，植物來源的酶zui適溫度為50-60℃。

酶的催化活性與環(huán)境PH有密切關系，通常各種酶只在一定PH范圍內(nèi)具有活性，酶活性zui高時的PH，稱為酶的zui適PH。高于或低于此PH時酶的活性逐漸降低。

酶的zui適PH不是一個特征物理常數(shù)，對于同一個酶，其zui適PH因緩沖液和底物的性質(zhì)不同而又差異。

在酶促反應過程中，抑制對酶的抑制作用可分為可逆抑制和不可逆抑制。可逆抑制有根據(jù)抑制劑和底物的關系分為三種類型；競爭性抑制，非競爭性抑制和反競爭性抑制。

實例如下：

一、試劑

5%三氯醋酸溶液。1mmol/L苯甲脒；稱取19.25g苯甲脒，用少量水溶解，定容至100ml。

1%酪蛋白溶液；取1g酪蛋白，加0.1mol/L氫氧化鈉溶液10ml、水40ml，置60℃水浴加入至溶解，放置室溫后，加水稀釋成100ml，并調(diào)至PH8.0.

0.1mol/L硼酸緩沖液；

A液，0.1mol/L硼酸（H2BO3)；稱取6.18gH3BO3溶于1000mL水中。

B液，0.025mol/L硼砂（Na2B4O7·10H2O);

稱取9.54g硼砂（Na2B4O7·10H2O）溶液1000ml水中。

PH7.4硼酸緩沖液；90ml A液+10ml B液

PH8.0硼酸緩沖液；70ml A液+30ml B液

PH9.0硼酸緩沖液；20ml A液+80ml B液、

材料

酪蛋白酶溶液：50-200ug/ml，用0.1mol/L,PH8.0硼酸緩沖液配制。可用粗提的豬胰蛋白酶，用量根據(jù)實際測得比活值而定。

儀器：

試管1.5cm x15cm（x19);移液管1ml（x7），2mL(x3)，5mL(x5);量筒100mL（x1），恒溫水?。?℃）；白瓷板；膠頭滴管。

操作方法；

溫度對酶活力的影響