如何正確的進(jìn)行細(xì)胞傳代呢?遠(yuǎn)慕生物告訴您

  適應(yīng)在體外培養(yǎng)條件下持續(xù)傳代培養(yǎng)的細(xì)胞稱為傳代細(xì)胞。幼年動(dòng)物的腎、肺、肝、卵巢、上皮、肌肉與腫瘤等組織的細(xì)胞較易培養(yǎng)，而神經(jīng)細(xì)胞則較難培養(yǎng)。原代細(xì)胞基礎(chǔ)上通過(guò)胰酶等物質(zhì)消化后繼續(xù)用于細(xì)胞培養(yǎng)的細(xì)胞，它與原代細(xì)胞具有相同核型。這類細(xì)胞在體外可以無(wú)限制分裂.下面小編就講一下細(xì)胞傳代的方法以及步驟:

1.【無(wú)菌環(huán)境】

在細(xì)胞實(shí)驗(yàn)之前要注意無(wú)菌環(huán)境的建立，紫外殺毒滅菌，酒精消毒都是十分有必要的。

2.【鏡下檢查】

鏡下檢查結(jié)果非常重要，鏡檢的結(jié)果非常重要，要根據(jù)你自己的觀察進(jìn)行細(xì)胞密度的識(shí)別，從而進(jìn)行細(xì)胞傳代比例的確定，進(jìn)行更好的細(xì)胞數(shù)量的控制，如果實(shí)驗(yàn)要求比較高，需要細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。

3.【過(guò)火焰】

記住，所有開(kāi)瓶的東西都要進(jìn)行過(guò)酒精燈外焰，瞬間高溫進(jìn)行灰塵的固定。這樣會(huì)大大減少染菌幾率。

4.【移液工具】

很多人對(duì)于移液工具都有偏好，不好說(shuō)什么就是正確的。但是從無(wú)菌角度。使用移液管比微量移液槍減少污染的幾率要高。希望大家能用移液管。

5.【交叉污染】

混勻細(xì)胞懸液和移取培養(yǎng)基以及血清的工具要分開(kāi)；還有就是胰酶和血清也要嚴(yán)格分開(kāi)，否則容易造成交叉感染，使細(xì)胞增加染菌幾率。

6.【消化時(shí)間】

對(duì)于貼壁細(xì)胞，我想要大家注意的是胰酶消化時(shí)間，對(duì)于常用0.25%的胰酶最好把消化時(shí)間控制在30s內(nèi)，必要是最好鏡檢看一下是否脫壁。但是這是一個(gè)經(jīng)驗(yàn)活，要多積累經(jīng)驗(yàn)。

7.【細(xì)胞混勻】

細(xì)胞的混勻要輕柔，氣泡的產(chǎn)生對(duì)細(xì)胞的狀態(tài)是有影響的，希望大家注意。另外，貼壁細(xì)胞容易粘連，所以要多吹打幾次。