考馬斯亮藍(lán)快速染色液實(shí)驗(yàn)操作時(shí)需注意細(xì)節(jié)
2017-12-07 13:56 來(lái)源:上海遠(yuǎn)慕生物試劑
考馬斯亮藍(lán)快速染色液是一種即用型快速靈敏而且安全的
染液,用于SDS-PAGE或者非變性膠的快速染色,在半小時(shí)內(nèi)就可以出結(jié)果。
考馬斯亮藍(lán)快速染色液靈敏度高達(dá)10ng,不僅節(jié)省了制備相關(guān)溶液所需的時(shí)間和精力,完全沒(méi)有毒性而且不需要酸、醇固定或者脫色,以其方便快捷的操作,卓越的靈敏度,成為蛋白質(zhì)染色產(chǎn)品中的首選。
適用范圍:SDS-PAGE或非變性PAGE蛋白電泳膠的快速染色,或Western轉(zhuǎn)膜后PAGE膠上殘余蛋白的檢測(cè)。
保存條件:2-8℃保存一年。
雖然考馬斯亮藍(lán)快速染色液因自身優(yōu)點(diǎn)成為蛋白質(zhì)染色產(chǎn)品中的首選,但在實(shí)驗(yàn)過(guò)程,以下幾點(diǎn)細(xì)節(jié)還需要注意:
1.PAGE電泳后凝膠采用蒸餾水清洗的目的在于去除凝膠中的SDS等干擾物質(zhì)。如果不能充分去除SDS會(huì)導(dǎo)致背景較高。如果凝膠很厚,洗滌時(shí)間應(yīng)適當(dāng)延長(zhǎng)、洗滌次數(shù)應(yīng)適當(dāng)增加。蒸餾水洗滌去除凝膠中的雜質(zhì)時(shí),如果使用經(jīng)過(guò)加熱或沸騰的蒸餾水,每次洗滌時(shí)間可以縮短至 1~2min。
2.染色時(shí)如果把凝膠和染色液一起放置在微波爐中適當(dāng)加熱,可以大大加快染色速度。但加熱時(shí)宜盡量避免沸騰,以免出現(xiàn)因暴沸而導(dǎo)致的凝膠碎裂。
3.如果希望染色的背景更低,希望獲得更加清晰的蛋白條帶,可以加入適量的室溫蒸餾水進(jìn)行洗滌。通過(guò)蒸餾水洗滌可以進(jìn)一步降低背景。在4℃蒸餾水中浸泡一段時(shí)間可以獲得背景更低,條帶更清晰的條帶。在次日對(duì)4℃蒸餾水浸泡一段時(shí)間的已經(jīng)進(jìn)行了染色的凝膠再同前一天一樣進(jìn)行染色和洗滌可以進(jìn)一步改善染色效果,獲得更好的染色蛋白條帶。
4.本染色液呈酸性,有輕微腐蝕性,使用時(shí)請(qǐng)作必要防護(hù)。
5.為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
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