蛋白marker

    蛋白marker

    蛋白marker的作用是什么，首先要要了解一下什么是蛋白marker。在WesternBlot過(guò)程中，分子量Marker就像個(gè)螺絲釘一樣沒(méi)雖然是個(gè)小細(xì)節(jié)，然而就是這樣一個(gè)小細(xì)節(jié)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果有著不可忽視的作用。

    蛋白marker的作用：

    Marker是表面覆蓋有特殊反光材料的標(biāo)記物，常見(jiàn)形狀有球形、半球形。染色體上一個(gè)可以被識(shí)別的區(qū)域（比如限制性內(nèi)切酶的酶切點(diǎn)，基因的位置等）。標(biāo)記的遺傳能夠被檢測(cè)出來(lái)。標(biāo)記可以是染色體上有表達(dá)功能的部分（比如基因），也可以是沒(méi)有編碼蛋白質(zhì)功能但遺傳特性能夠被檢測(cè)出來(lái)的部分。其次，蛋白marker可分為未預(yù)染的Marker即寬分子量蛋白標(biāo)準(zhǔn)、高分子量蛋白標(biāo)準(zhǔn)以及低分子量蛋白標(biāo)準(zhǔn)以及預(yù)染的Marker即單色預(yù)染和多色預(yù)染。

    預(yù)染蛋白分子量標(biāo)準(zhǔn)

    預(yù)染蛋白分子量是一些純化好的蛋白混合物，通過(guò)與染料共價(jià)耦聯(lián)，在電泳過(guò)程中或者轉(zhuǎn)膜時(shí)可以直接觀察到。預(yù)染蛋白分子量的出現(xiàn)方便了我們的實(shí)驗(yàn)，這種蛋白分子量標(biāo)準(zhǔn)可以幫助我們?cè)陔娪緯r(shí)、電泳后，以及轉(zhuǎn)膜后監(jiān)測(cè)電泳情況和估計(jì)遷移率。值得注意的是預(yù)染蛋白Marker與染料共價(jià)耦聯(lián)，所以在不同的緩沖條件下電泳時(shí)遷移特性可能會(huì)發(fā)生某些變化，可能導(dǎo)致一些偏差，所以不太適合精確定位蛋白——不過(guò)多數(shù)情況下Marker的條帶未必能和我們的目標(biāo)蛋白完全一樣，我們得到的也不過(guò)是一種相對(duì)Marker指示的參考大小，最后都需要Western來(lái)定性，所以如果不是要區(qū)分大小相近的條帶，預(yù)染Marker還是很好用的，而且也可以和未染色的蛋白標(biāo)準(zhǔn)一起使用。

    蛋白分子量標(biāo)準(zhǔn)可以分成未染蛋白分子量標(biāo)準(zhǔn)、預(yù)染蛋白分子量標(biāo)準(zhǔn)二個(gè)級(jí)別。蛋白標(biāo)準(zhǔn)還有表示轉(zhuǎn)移成功或者蛋白在凝膠上的電泳程度等等的作用，所以選擇正確的蛋白Marker也是westernblot實(shí)驗(yàn)成功的必要條件之一。以上就是今天要介紹的蛋白marker的作用。