微生物培養(yǎng)基配制步驟與注意事項
2024-10-25 9:53 來源:上海遠慕生物試劑
微生物培養(yǎng)基配制注意事項
1、根據(jù)不同微生物的營養(yǎng)需要配制不同的培養(yǎng)基。
2、注意各種營養(yǎng)物質的濃度及合適配比,保持合適滲透壓。
3、將培養(yǎng)基的 pH 控制在適宜的范圍之內,以利于不同類型微生物的生長繁殖或代謝產(chǎn)物的積累。
4、要注意各種原料的配比,每種培養(yǎng)基的配比合適的配比,可以按照老師的要求去做。
5、如需要加熱的時候注意時間的把握。
步驟:
(一)準確稱量試劑:根據(jù)不同的菌類和用途,選擇適宜的培養(yǎng)基,培養(yǎng)基所需試劑必須純凈。
(二)校正pH值:將稱量好的培養(yǎng)基各種成分放入容器內,標記劃線,加熱溶解,補充水分,測定酸堿度,常用pH6.8~8.0的精密試紙或酸度計測定。用1NNaOH和1N HCl調節(jié)pH值到適宜范圍內。
(三)過濾:將玻璃漏斗置鐵架上,再用紗布夾棉花或用濾紙放在漏斗中,將上述培養(yǎng)基倒入其中過濾至透明。
(四)分裝:將過濾后的培養(yǎng)基分裝于中試管或三角瓶內(試管內每支裝5mL;三角瓶中裝100~150ml),塞好棉塞用牛皮紙包扎好,準備滅菌。
(五)滅菌:培養(yǎng)基的滅菌,常用高壓蒸汽滅菌法。一般微生物的營養(yǎng)細胞在水中煮沸后即被殺死,但細菌的芽胞有較強的抗熱性,須經(jīng)高壓蒸汽滅菌才能達到徹底滅菌的目的。根據(jù)蒸汽溫度隨壓力升高而上升的原理,即壓力越大,蒸汽溫度就越高。因此,在同一溫度條件下,采用高壓蒸汽滅菌比干熱滅菌法效果要好。而且在濕熱情況下,菌體吸收水分后,其蛋白質易于凝固變性,因為蒸汽的穿透力強,殺菌效果好。