rt-pcr和實(shí)時(shí)熒光定量pcr實(shí)驗(yàn)區(qū)別分析

rt-pcr和實(shí)時(shí)熒光定量pcr區(qū)別如下：

1、所說的PCR應(yīng)該就是最常規(guī)的PCR，以DNA為模板，通過上下游引物，實(shí)現(xiàn)DNA的擴(kuò)增。

2、RT-PCR一般情況下是指反轉(zhuǎn)錄PCR（reverse transcription），盡管有些資料上說實(shí)時(shí)熒光定量PCR也（realtime fluores-cence quantitative PCR）也簡(jiǎn)稱RT-PCR，但是這是不對(duì)的，不推薦。

基本操作過程是將所提取的RNA進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄，然后將所獲得的cDNA作為模板，設(shè)計(jì)引物進(jìn)行擴(kuò)增，是一種檢測(cè)基因表達(dá)的常用方法。

3、實(shí)時(shí)熒光定量PCR也就是Real-Time PCR，其最大的作用是檢測(cè)樣品中的初始DNA濃度。

至于三者的關(guān)系，RT-PCR和實(shí)時(shí)定量PCR應(yīng)該都屬于PCR，在RNA實(shí)驗(yàn)中，這二者都會(huì)應(yīng)用到。

例如你要比較2個(gè)組織中的某基因的表達(dá)差異，首先你要提取2個(gè)組織的總RNA，然后通過RT-PCR檢測(cè)該基因是否在2個(gè)組織中有表達(dá)，然后通過實(shí)時(shí)定量PCR測(cè)定該基因在2個(gè)組織中的表達(dá)量是否具有顯著性差異。