石蠟切片與冰凍切片在實(shí)驗(yàn)中的區(qū)別

在組織學(xué)中，石蠟切片和冰凍切片都是常用的方法，前者常用于進(jìn)行免疫組化實(shí)驗(yàn)，后者則常用于免疫熒光實(shí)驗(yàn)。

組織學(xué)常規(guī)制片技術(shù)中最為廣泛應(yīng)用的切片方法，為石蠟切片與冷凍切片。石蠟切片法包括取材、固定、洗滌和脫水、透明、浸蠟、包埋、切片與粘片、脫蠟、染色、脫水、透明、封片等步驟，為永久性顯微玻片標(biāo)本。石蠟切片不僅用于觀察正常細(xì)胞組織的形態(tài)結(jié)構(gòu)，也是病理學(xué)和法醫(yī)學(xué)等學(xué)科用以研究、觀察及判斷細(xì)胞組織的形態(tài)變化的主要方法。多應(yīng)用于手術(shù)中的快速病理診斷。而且也被用于其他許多學(xué)科領(lǐng)域的研究中。

冷凍切片技術(shù)，是一種在低溫條件下使組織快速冷凍到一定的硬度，然后進(jìn)行切片的一種方法。被稱為病理科的急診工作----在外科手術(shù)過(guò)程中，醫(yī)生切取部分腫瘤組織或其它病變標(biāo)本，送檢到病理科通過(guò)快速冷凍標(biāo)本制作切片，病理科診斷醫(yī)師對(duì)該切片進(jìn)行觀察快速做出判斷得出良、惡性結(jié)果或某種疾病的診斷。
冷凍切片與常規(guī)石蠟切片有什么區(qū)別呢？遠(yuǎn)慕簡(jiǎn)單介紹一下：

1、制作方式不同：①冷凍切片要求送檢新鮮組織，采用低溫恒冷切片機(jī)，將取材組織置于-25℃冷凍箱內(nèi)速凍3-5分鐘，切8微米厚度切片，固定后水洗直接染色，針對(duì)不同組織采用不同溫度進(jìn)行切片。②石蠟切片--送檢組織用10%中性福爾馬林固定，標(biāo)準(zhǔn)取材后，置入全自動(dòng)脫水機(jī)進(jìn)行脫水、透明、浸蠟，再進(jìn)行包埋、切片，厚度3-5微米，將切片烤片后，置入全自動(dòng)染色機(jī)進(jìn)行染色。

2、鏡下觀察不同：①冷凍切片---因?yàn)槔鋬鼋M織未經(jīng)過(guò)固定是新鮮組織冷凍切片，沒(méi)有經(jīng)過(guò)充分的脫水，對(duì)組織的觀察會(huì)有一定的影響，所以切片鏡下細(xì)胞、組織略顯腫脹，診斷準(zhǔn)確率95%以上。②石蠟切片---因?yàn)榻M織塊經(jīng)過(guò)10%中性福爾馬林固定，酒精梯度脫水、二甲苯透明、石蠟包埋，所以切片平整、顏色鮮艷、細(xì)胞組織結(jié)構(gòu)清晰可見(jiàn)，診斷準(zhǔn)確率99%以上。

3、用途不同：①冷凍切片用于術(shù)中病理診斷，達(dá)到迅速做出診斷，包括良、惡性、切緣及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況。所以要求病理診斷醫(yī)師具有高年資病理診斷經(jīng)驗(yàn)，取材部位精準(zhǔn)， 病理技術(shù)人員具有冰凍切片的經(jīng)驗(yàn)。②石蠟切片用于術(shù)后病理診斷，要求離體組織及時(shí)固定，保持組織原有結(jié)構(gòu)及成分固定在原有位置，經(jīng)過(guò)一系列技術(shù)處理，通過(guò)這些處理可以使得切片在顯微鏡下清晰的辨認(rèn)其形態(tài)結(jié)構(gòu)，組織細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)保存良好，可以幫助醫(yī)生更加準(zhǔn)確的做出診斷。由于冷凍切片存在質(zhì)量和時(shí)間上的限制，冷凍切片病理診斷對(duì)腫瘤的分型不一定非常準(zhǔn)確，對(duì)部分無(wú)法確定組織學(xué)類(lèi)型的病例，還需要等待常規(guī)的石蠟切片予以確診。冷凍切片較石蠟切片制作厚，做出來(lái)的切片沒(méi)有石蠟切片清晰。

總之，簡(jiǎn)單概括起來(lái)，兩者之間最大區(qū)別是冰凍切片操作便捷性高，能很好保持抗原活性、脂肪、類(lèi)脂成分。石蠟切片組織形態(tài)好，能切更大組織，切片厚度薄，連片性好，對(duì)標(biāo)本的長(zhǎng)期保存非常適合。