原代培養(yǎng)技術(shù)的注意事項(xiàng)

一、注意污染

1、嚴(yán)格進(jìn)行動物皮膚消毒，使用三套器械取材。新生動物皮膚先用2%碘酒液消毒，成年鼠先用3%~5%碘酒液消毒后用75%酒精消毒。

2、嚴(yán)格進(jìn)行無菌操作，防止細(xì)菌、霉菌、支原體污染，避免化學(xué)物質(zhì)污染。自取材開始，保持所有組織細(xì)胞處于無菌條件。細(xì)胞計(jì)數(shù)可在有菌環(huán)境中進(jìn)行。

3、吸取液體前，瓶口和吸管進(jìn)行火焰消毒；吸取液體時(shí)，避免瓶口和吸管碰撞。

4、離心管入臺前，管口、管壁應(yīng)消毒。

5、實(shí)驗(yàn)者離開超凈臺時(shí)，要隨時(shí)用肘部關(guān)閉工作窗。

6、使用過的器械用酒精棉球擦去血污后，移入另一個(gè)器皿中繼續(xù)消毒，在浸泡器械時(shí)剪刀口要叉開放，鑷子彎頭要向下放，并加蓋消毒。凡在超凈臺外操作的步驟，各器皿需用蓋子或橡皮塞，以防止細(xì)菌落入。

二、器材使用時(shí)既要注意用火焰消毒，又要防止?fàn)C傷、燙死細(xì)胞。經(jīng)火焰消毒后的吸管一定要用Hanks液冷卻。

三、超凈臺內(nèi)溫度、濕度較大，在夏天工作時(shí)臺內(nèi)散熱更慢，因此進(jìn)行細(xì)胞懸液混勻、接種時(shí)，離火焰要稍微遠(yuǎn)些，組織細(xì)胞、培養(yǎng)液等不能暴露過久，以免溶液蒸發(fā)。